吉林省吉林市长岭县第四中学2012届高三生物一轮复习 专题1、2 生物技术实践课件.pptVIP

(2)间接计数法(活菌计数法) ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②操作： a．设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 b．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 ③计算公式：每克样品中的菌株数＝ ×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 2．分解纤维素的微生物的分离 (1)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 ②实验流程 土壤取样：富含纤维素的环境 ↓ 选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量 梯度稀释 ↓ 涂布平板：将样品涂布于鉴别含CR的纤维素分解菌的培养基(固体) ↓ 挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈。 (2)两种刚果红染色法的比较 ①方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，过程如下：培养基经涂布培养长出菌落→覆盖质量浓度为1 mg/mL的CR溶液 倒去CR溶液→加入1 mol/L的NaCl溶液 倒掉NaCl溶液→出现透明圈。 ②方法二：倒平板时就加入刚果红，过程如下：配制质量浓度为10 mg/mL的CR溶液→灭菌→按照每200 mL培养基加入1 m