组织培养实验室及操作技术1-1.pptVIP

5、肌醇 ◆环己六醇 ◆细胞壁的构建材料 ◆参与碳水化合物、磷脂代谢及离子平衡等生理活动 ◆促进活性物质发挥作用 6、氨基酸 ◆蛋白质的组成成分 ◆有机氮源 ◆可直接被细胞吸收利用 ◆培养基中常用的是甘氨酸 7、天然复合物 ◆促进某些愈伤组织和器官的生长 ◆化学成分不明、复杂 ◆天然营养混合物 如：水解酪蛋白、玉米胚乳、酵母提取物 8、琼脂 ◆是使用最普遍的凝固剂 ◆用量一般在6—10g/L之间 ◆颜色以浅、透明度高好，洁净为上品 除了琼脂外，在组织培养中还可以使用琼脂糖、结冷胶等。 9、活性炭 ◆吸附培养基及培养物分泌物中的抑制物质 ◆抑制外植体褐变 ◆防止玻璃苗的产生 ◆促进培养物生长和分化 ◆促进生根 缺点： ◆没有选择性 10、抗生素 ◆防止外植体内生菌造成的污染 活性炭 11、生长素类 ◆促进细胞伸长和分裂 ◆促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长休眠、顶端优势、单性结实 ◆诱导愈伤组织形成 ◆溶于95%酒精或0.1mol/L的NaOH中，后者的溶解效果更好 ◆常用的生长素： IAA(吲哆乙酸) NAA (奈乙酸 ) 2,4-D(二氯苯氧乙酸) IBA(吲哆丁酸) 12、细胞分裂素类 ◆促进细胞分裂和分化 ◆诱导胚状体和不定芽的形成 ◆延缓组织的衰老并增强蛋白质的合成 ◆用于离体成花的调控 ◆溶于0.5—1.0mol/L的盐酸或稀薄的NaOH中 ◆常用的细胞分裂素： KT (激动素) BA(6-卞基腺嘌呤) 2-ip(异戊烯氨基嘌呤)玉米素 13、赤霉素类和脱落酸 A、赤霉素类 ◆组织培养中不常使用 ◆加速细胞的伸长生长 ◆促进细胞的分裂 ◆主要是GA3 B、脱落酸 ◆抑制细胞分裂和伸长 ◆促进脱落和衰老 ◆促进休眠和提高抗逆能力 ◆培养基形态不同：固体培养基、液体培养基 ◆培养过程不同：初代培养基、继代培养基 ◆其作用不同：诱导培养基、增殖培养基、生根培养基 ◆营养水平不同：基本培养基、完全培养基 一、培养基的种类 第三节 培养基的配制、灭菌与保存 1、MS培养基 ◆无机盐浓度高 ◆高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐 ◆含有一定数量的铵盐 ◆营养丰富 ◆不需要添加更多的有机附加物 二、几种常见培养基的特点 2、White培养基 ◆1943年由White为培养番茄根尖而设计 ◆ 1963年作了改良，提高MgSO4的浓度和增加硼元素 ◆无机盐浓度较低 ◆使用广泛 ◆在生根培养、胚胎培养中有良好的效果 大量元素 含量 微量元素 含量 铁盐 含量 有机物 含量 其他 含量 KNO3 80 H3BO3 1.5 Fe2(SO4)3 2.5 肌醇 100 蔗糖 30000 Ca(NO3)2 4H2O 300 MnSO4 4H2O 7.0 烟酸 0.3 琼脂 8000 MgSO4 7H2O 720 ZnSO4 7H2O 3.0 盐酸硫胺素 0.1 NaH2PO4 4H2O 16.5 MoO3 0.0001 盐酸吡哆辛 0.1 KCl 65 CuSO4 5H2O 0.001 甘氨酸 3 Na2SO4 200 附表：White培养基 3、B5培养基 ◆1968年由Gamborg等为培养大豆根细胞而设计 ◆含有较低的铵盐 ◆较高的硝酸盐和盐酸硫胺素 组成成分 数量(mg/l） 组成成分 数量(mg/l) KNO3 2500 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 150 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O