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2.微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用 对照组 作用 现象 结论 未接种培养基 有无杂菌污染的判断 未接种的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 接种的LB全营养培养基 选择培养基筛选作用的确认 LB全营养培养基上的菌落数大于选择培养基上的数目 选择培养基具有筛选作用 3.样品稀释的原因和标准 (1)稀释原因:样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数。在适当的稀释度下,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。因此,恰当的稀释度是成功地统计菌落数的关键。 (2)稀释标准:选用一定范围的样品稀释液进行培养,为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板计数。 模拟演练 1 2 3 4 答案 1.下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是 A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌 B.划线操作须在火焰上进行 C.在5区域中才有可能得到所需菌落 D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 √ 解析 1 2 3 4 解析 操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌,A项错误; 划线操作须在火焰旁进行,B项错误; 在5区域中最有可能得到所需菌落,C项错误; 在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌,D项正确。 答案 解析 2.下列关于大肠杆菌的培养的叙述,不正确的是 A.在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑pH、温度和渗 透压等条件 B.若对大肠杆菌活菌进行计数,要想使所得估计值更接近实际值,除应 严格操作、多次重复外,还应保证待测样品的稀释度合适 C.在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进 行消毒 D.使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃 √ 1 2 3 4 解析 微生物培养条件有营养条件、pH、温度、渗透压等,A正确; 为计数活菌数,要多次实验求平均值、操作要严格,还要保证样品的稀释度合适,便于检测,B正确; 为防止杂菌污染,对培养基和培养皿要进行灭菌,C错误; 为防止对环境的污染,用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,D正确。 1 2 3 4 答案 解析 3.下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程,请回答下列问题: ? (1)该实验培养基不能含有___。 A.尿素 B.氯化钠 C.葡萄糖 D.琼脂 D 1 2 3 4 解析 分离以尿素为氮源的微生物,应该以尿素为唯一氮源,所以不应有琼脂。 答案 (2)尿素溶液可用___________________使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底,可以采用的方法是 _______________________________________ __________________。 G6玻璃砂漏斗过滤 1 2 3 4 将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间,观察有无菌落出现 解析 解析 尿素用G6玻璃砂漏斗过滤除去其中的细菌等微生物。 答案 (3)图中步骤C为_______。相对于划线分离法,过程D涂布分离法的优点是_______________。 倒平板 1 2 3 4 单菌落更易分开 (4)如果菌落周围出现___色环带,说明该菌落能分泌脲酶。 1 2 3 4 解析 解析 若菌落能分泌脲酶,则菌落周围会出现红色环带。 答案 红 4.(2017·宁波期末测试)石油烃是环境的重要污染源。为了筛选出具有强分解石油烃能力的微生物,进行了一系列操作,请回答下列问题: (1)分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离,获取土壤样品的取样地点最好选在_______________。 1 2 3 4 解析 解析 分解石油烃的微生物在石油污染明显处分布较多。 答案 石油污染明显处 (2)微生物实验室采用___法对培养基进行灭菌处理。 A.干热灭菌 B.过滤灭菌 C.灼烧灭菌 D.高压蒸汽灭菌 1 2 3 4 解析 解析 微生物实验室常用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌。 答案 D (3)下图为获取土壤样品后的培养研究过程: ? 为了能有效地分离出分解石油烃的微生物,过程①~④所用培养基的成分的特点是_____________________,从而有利于分解石油烃的微生物的生长。 1 2 3 4 解析 解析 实验过程中,过程①~④所用培养基应用石油烃作为唯一碳源,以抑制其他种类微生物的生长,从而分离出以石油烃为碳源的微生物。 答案 以石油烃作为唯一碳源 (4)对④进行接种常采用的两种方法分别是____________和____________。 1 2 3 4 解析 解析 在微生物的分离实验中,常用划线分离法或涂布分离法进行
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