DB11-T 829-2011 白菜品种纯度及真 实性分子检测方法.pdfVIP

ICS 65.020.20 B 21 备案号： DB11 北 京 市 地 方 标 准 DB11/T 829—2011 白菜品种纯度及真实性分子检测方法 Methods of identifying varietal purity and genuineness of Chinese cabbage by using molecular markers 2011 - 11 - 10 发布 2012 - 03 - 01 实施 北京市质量技术监督局 发 布 DB11/T 829—2011 目 次 前言 II 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语与定义 1 4 原理 2 5 仪器设备及耗材 2 6 试剂和溶液配制 2 7 引物选用原则及筛选方法 3 8 操作步骤 4 9 检测结果 6 附录A （规范性附录） 所用溶液的配置方法 8 附录B （资料性附录） 白菜品种纯度检测常用的SSR 引物名称及序列 11 附录C （资料性附录） 白菜真实性鉴定常用的ISSR 引物名称及序列 13 附录D （规范性附录） 白菜基因组DNA 提取方法 15 附录E （规范性附录） 6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 17 附录F （规范性附录） 5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 19 I DB11/T 829—2011 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由 京市农业局提出。 本标准由 京市农业标准化技术委员会归口。 本标准由 京市农业局组织实施。 本标准起草单位： 京市种子管理站。 标准主要起草人：田雷、赵山普、贾希海、赵青春、彭瑞迪、王辉、福德平、高勇、张连平、黄寰。 II DB11/T 829—2011 白菜品种纯度及真实性分子检测方法 1 范围 本标准规定了结球白菜和不结球白菜种子品种纯度及真实性鉴定的SSR、ISSR分子标记检测方法和 对检测结果的判定标准。 本标准适用于结球白菜和不结球白菜常规种子、杂交种子及其亲本的品种纯度和真实性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 3543.4 农作物种子检验规程 发芽试验 GB/T 3543.5 农作物种子检验规程 真实性和品种纯度鉴定 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 SSR标记 simple sequence repeat marker，SSR 简单重复序列（SSR）,又称短串联重复序列或微卫 序列，它是一类以1bp～5bp的短核苷酸序列为 基本单位串联重复状分布于整个基因组内的重复序列。 3.2 ISSR标记 inter simple sequence repeat ma