基因工程概论3.pptVIP

重组DNA技术与基因工程的基本概念 A DNA的体外重组（切与接） B 重组DNA分子的转化和扩增（转与增） C 转化子的筛选和鉴定（检） C 转化子的筛选和鉴定（检） 3 基因工程的操作过程 载体遗传标记检测 克隆DNA序列检测 外源基因产物检测 3 重组DNA技术的操作过程 由于重组率和转化率不可能达到理想极限，因此必须借助各种筛选和鉴定方法区分转化子与非转化子、重组子与非重组子、目的重组子与非目的重组子。 转化子 重组子 目的重组子 载体遗传标记检测 抗药性筛选法 抗药性筛选法的基本原理： ROP ROI Sal I BamH I Tc r Pvu I Pst I Pst I EcoR I Cla I Hind III Hind II Bal I Ap r pBR322 4363 bp ori 抗药性筛选法可区分转化子与非转 化子、重组子与非重组子。 将外源DNA片段插在EcoRI位点： 非重组子呈 Apr、Tcr 重组子呈 Apr、Tcr 将外源DNA片段插在BamHI位点： 非重组子呈 Apr、Tcr 重组子呈 Apr、Tcs 载体遗传标记检测 抗药性筛选法 抗药性筛选法的基本操作： 先将转化液涂布含有Ap的平板，再 将Ap平板上的转化子影印至含有Ap 和Tc的平板上。