PEG慢病毒纯化试剂使用说明.PDFVIP

    PEG 慢病毒纯化试剂  使用说明  产品简介：  PEG 慢病毒纯化试剂是基于 PEG6000 沉淀法纯化慢病毒，纯化过程中无需使用高速离心机进行长时间离心， 全部纯化时间仅需 2 小时左右。PEG 慢病毒纯化试剂可将病毒液浓度提高 10‐20 倍，病毒回收率在 95% 以上。 PEG 慢病毒纯化试剂成分经过优化，在病毒纯化过程中可以保持慢病毒活性。病毒在该试剂中可保持稳定 24 小时以上。    规格：  货号 规格 价格 P1201 100ml ￥400 P1202 200ml ￥700   保存：  本品在 4 ℃可保存 6 个月，如需长期保存可‐20℃冻存。  注意：该试剂解冻后需要沉淀溶解并完全混匀后才能使用。      所需试剂、耗材和仪器：  冷冻离心机（50ml 或 15ml 容量）；0.45μm 过滤器（推荐使用 Millipore 低蛋白结合滤膜 PES 或 PVDF）；无菌 PBS 溶液。        Tel ：010                                                     Email：order@  操作步骤  1、 收集病毒上清液，室温 500g 离心 10 分钟，去除细胞碎片，将病毒液转移到一个新的离心管中。  2、用 0.45μm 过滤器过滤病毒液。  3、将病毒液转移到新的离心管，保证病毒液体积不超过离心管容积的 2/3。准确计量病毒液体积，每 10ml 病毒液加入 PEG 慢病毒纯化试剂 4.7ml 。  注意：PEG 慢病毒纯化试剂比较粘稠，需要缓慢吸取，缓慢加入。保持病毒液和纯化试剂体的精确体积 比非常重要。  4 、反复颠倒混匀，直到病毒液和纯化试剂完全混合。4 ℃沉淀 1.5 小时，每 0.5 小时将混合液反复颠倒混匀 1 次。（可将病毒混合液放置在冰水混合物中，或者4 °冰箱进行沉淀）。  5、沉淀完成后病毒混合液应该变浑浊。4 ℃，7000g，10min 离心病毒混合液。离心后可见白色沉淀。去除 上清。  6、将离心管倒置在滤纸上，去除残留液体。用原病毒液体积 1/20 的 PBS 重悬沉淀。分装用‐80℃冻存。    注意事项  1、用 0.45μm 过滤器过滤后的步骤应保持无菌操作。  2、 PEG 慢病毒纯化试剂和病毒液的体积比是高效回收病毒的关键。  3、 PEG 慢病毒纯化试剂可以保持病毒活性稳定。所以病毒沉淀步骤也可以 4 ℃过夜。但是这样沉淀中的杂 蛋白相对较多，因此我们不推荐这样操作。  4 、病毒沉淀时保持低温很重要，推荐用冰水混合物保持温度。  5、如果病毒包装得比较好，那么沉淀应该全部溶解或者大部分溶解。如果病毒包装时死亡细胞较多，那么 病毒沉淀的重悬液中的不溶成分可能较多。这些成分不会影响病毒的感染效率，无需离心去除。  Tel ：010                                                     Email：order@