CFSE 标记细胞及测定细胞增殖.docVIP

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CFSE 标记细胞及测定细胞增殖

CFSE 标记细胞及测定细胞增殖 以小鼠CD4 T 细胞为例 Buffer A:PBS+0.1%BSA,过滤灭菌 分离小鼠脾细胞 MACS法分离小鼠 CD4+ T细胞 用buffer a 重悬细胞,细胞浓度为1*107 /ml 加入CFSE,终浓度为5 ?M 37度孵育10 min 补加含血清的1640 10 ml 冰上5min 1000 rpm 离心 5min 再加入含血清1640 10 ml,1000 rpm 离5min 如此重复2次 细胞用含血清1640重悬即可 当用流式细胞仪测定细胞增殖时,选用FL1 通道检测,测定前还可用FL1以外的荧光染料对细胞进行标记 (如 anti-CD4 PE, anti-CD3 PE/Cy5)

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