遗传学第五章--7细菌同源重组的机制.pptVIP

第五章 细菌的遗传分析 第七节 细菌同源重组的机制 一、细菌同源重组的特点 同源重组（homologous recombination）：又称普遍性重组，发生依赖于较大范围的DNA同源序列的联会。 细菌同源重组发生在环状闭合双链DNA与线状DNA片段（单、双链）之间 二、细菌同源重组的分子基础 （1）RecBCD识别chi序列引发重组 Chi位点： recBCD基因编码酶的识别位点，可以促进附近区域重组 RecBCD：提供游离的3’端单链（重组条件） ① 降解DNA，核酸酶活性 ② 解旋酶活性， ③ ATP酶活性 （2）RecA催化单链同化 RecA：DNA链转移蛋白 功能： ①促进SOS反应中的蛋白酶活性 ②促进DNA的单链与双链DNA分子中的互补链之间进行碱基配对。 条件： ①ATP ②单链DNA （2）RecA催化单链同化 RecA可使一条DNA单链置换一条双链DNA分子中同源链的反应称为单链同化（single-strand uptake or assimilation）。 发生条件： ①单链区 ②游离的3’ ③单链区和游离的3’必须位于这两个分子的互补区域 单链同化的方式 一条线性单链或环形单链入侵一条双链DNA分子，会置换与它互补的链 双链链与双链之间的反应 要求其中一条含有一段至少50个碱基的单链区 从线性分子一端开始同化，入侵的单链置换双链DNA中的同源部分。 反应到达两个分子都是双链的区域时，入侵链从它的互补链上解离下来，互补链再与被置换链配对。 （3）Ruv系统解离Holiday连接点 由ruv基因产物——蛋白质RuvA、RuvB、RuvC—稳定和解开Holiday连接点 RuvAB使分支以10-20bp/s速度迁移 RuvC是核酸内切酶，能专一识别Holiday连接点，解开中间体 细菌重组与DNA损伤修复 细菌重组可以对DNA损伤进行修复，重组的过程中利用一条双链DNA的序列填补另一条双链DNA的缺口间隙。 思考题 问答：什么是同源重组，细菌同源重组有什么特点？ 细菌同源重组的分子机制如何？ * * 外源链a+ 外受链a- 5’ GCTGGTGG 3’ 3’ CGACCACC 5’ RecBCD结合到chi位点右侧DNA时，沿DNA移动，使之解链，释放含3‘端的单链 当它到达chi位点时，暂停并在距chi位点右侧4-6个碱基处切开DNA的上链(核酸酶活性)，于是这条链就以单链被识别 在识别chi位点后，使RecD亚基解离或失活，从而丧失核酸酶活性 RecBC只保留解旋酶活性，继续起着解旋作用 chi位点 RecBCD RecBC 中间体 中间体 细菌转化的重组机制 实质是单链DNA片段与完整双链DNA之间的重组，如下情况： ①切除外源DNA——无重组 ②切除受体DNA——发生重组 ③无修复作用 ——子代细胞出现两种基因型（受体基因型和重组体基因型） 外源链a+ 受体链a- RecA 结合在单链DNA 互补配对形成中间体 双链DNA一条链 被单链置换，形成异源双链DNA分子 Holiday 连接点 RuvA识别Holiday连接点，在交换点处与四条DNA链结合，形成两个四聚体将DNA夹在中间 RuvB是六聚体解旋酶，有ATP酶的活性，为分支迁移提供动力