红细胞血型血清学检测技术规范标准.pptVIP

红细胞血型血清学 检测技术规范 上海市血液中心 红细胞血型参比实验室 孙继丽 2008-9-10 主要内容 中国输血技术操作规程(血站部分)1997年版 中国输血技术操作规程(血站部分)(征求意件稿) AABB Technical Manual 14th ed AABB Standard 21st ed 对标本的一般要求 实验室所检测标本须有清晰的惟一性标识； 标本须和血液、血液成分制品来自于同一献血者； 所检测的标本可为抗凝的或不抗凝的标本, 抗凝 剂推荐使用乙二胺四乙酸(EDTA)； 遵守试剂/仪器使用说明书中所限定的标本制备和 保存步骤；当说明书内容不能涵盖相关要求时,可 用经确认的标本制备和保存步骤； 肉眼判定标本是否存在影响检测结果的因素, 如溶 血、脂血等。 仪器设备的要求 仪器设备在安装后，需校准方可使用，校准 周期至少一年一次，仪器设备需有维护程序。 所有的校准、维护须有记录。 仪器设备所使用的软件和实验室的信息系统 须经过确认。 记录的要求 所有检测标本具有可追溯性。 核对当前ABO/RhD定型结果与既往的血型记录是否一致，结果不一致必须查找原因。 ABO血型鉴定 Rh血型鉴定 红细胞血型抗体鉴定 交叉配血试验 HDN血型血清学检查 检测项目 原理: 根据红细胞上和血清(或血浆)中有或无A抗原或/ 和B抗原及其抗体, 将血型分为A、B、AB及O型。 ABO血型鉴定 方法: 红细胞凝集试验 正定型 用已知抗-A或抗-B定型试剂来测定红细 胞上有无相应的A抗原或/和B抗原 反定型 用已知A1型细胞和B型细胞来测定血清中 有无相应的抗-A或/和抗-B 正反定型结果不一致或有疑问，需进一步行ABO血型确认试验。 ABO血型鉴定 ABO亚型鉴定 A1和A2亚型鉴定 原理: 抗-A血清中含有抗-A和抗-A1两种抗体，抗-A可以凝集A型和AB型红细胞，而抗-A1只能与部分A型和AB型红细胞反应，据此凡与抗-A1强反应者被定为A1或A1B型，不与抗-A1反应，而与抗-A强反应者被定为A2或A2B型。 鉴定其他弱A或弱B亚型 红细胞与抗-A、抗-A1、抗-B及抗-AB的凝集程度 红细胞上的H物质活性的强弱 血清中是否存在抗-A1和不规则抗-B 分泌型人唾液中A、B、H物质 方法: 凝集反应、吸收放散、血凝抑制试验(唾液试验) 新生儿红细胞ABO血型抗原较弱，不宜作亚型鉴定。 ABO亚型鉴定 Rh血型鉴定 原理: Rh血型系统最常见的抗原主要有C,c,D,E,e 5种。 可分别用抗C、抗c、抗D、抗E、抗e这5种Rh 定型试剂通过血凝试验来检查红细胞上是否存 在相应抗原。在临床输血中，一般只做D抗原 的鉴定。凡被检红细胞和抗D试剂凝集者为 RhD阳性，不凝集者为RhD阴性。 方法: 根据所选试剂的恃性，Rh血型的鉴定方法可采用试管直接盐水凝集法，酶技术、抗人球蛋白技术、聚凝胺、微柱凝胶等。 Rh血型鉴定 RhD阴性确认试验 D变异型 弱D 不完全D D抗原位点数减少 抗原结构产生变异 与常规使用的抗D定型试剂不凝集或弱凝集 采用含IgG抗D抗体的 采用抗不同D表位的抗D 试剂进行抗球蛋白试验 抗体测定不同D表位 当确定红细胞上无D蛋白表达时， 才能最终判定被检标本为RhD阴性 RhD血型鉴定 要求: 红细胞在直接凝集试验中被IgM抗-D凝集的和在R