分子生物学第四章 生物信息的传递（下）――从mRNA到蛋白质.pptVIP

蛋白质的生物合成步骤 (1)翻译的起始 核糖体与mRNA结合并与氨酰-tRNA生成起始复合物。 (2)肽链的延伸 由于核糖体沿mRNA5 ′端向3′端移动，开始了从N端向C端的多肽合成，这是蛋白质合成过程中速度最快的阶段。 (3)肽链的终止及释放 核糖体从mRNA上解离，准备新一轮合成反应。 翻译：指将mRNA链上的核苷酸从一个特定的起始位点开始，按每三个核苷酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。 4.1遗传密码——三联子 三联子密码定义 mRNA链上每三个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这三个核苷酸就称为密码子或三联子密码(triplet coden) 。 4.1.1 三联子密码的破译 首先从数学的角度来考虑：mRNA中有4种核苷酸，蛋白质中有20种氨基酸；以一种核苷酸代表一种氨基酸则蛋白质中只能有4种氨基酸，不行。 以两种核苷酸作为一个氨基酸的密码(二联子)，它们能代表的氨基酸只有42＝16种，不足20种，也不行。 以3个核苷酸代表一个氨基酸，则可以有43＝64种密码，可以满足编码20种氨基酸的需要。 三联子密码破译图解说明 1）Paul Zamecnik等人证实细胞中蛋白质合成的场所。 实验3:???以均聚物为模板指导多肽的合成。 在含有tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其它蛋白质因子的细胞抽提物中加入mRNA或人工合成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板来决定。1961年，Nirenberg等以poly（U）作模板时发现合成了多聚苯丙氨酸，从而推出UUU代表苯丙氨酸（Phe）。以poly（C）及poly（A）做模板分别得到多聚脯氨酸和多聚赖氨酸。 实验4:??以特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成。以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽，?5′ …UGU GUG UGU GUG UGU GUG…3′,不管读码从U开始还是从G开始，都只能有UGU（Cys）及GUG（Val）两种密码子。 实验5:??? 以共聚三核苷酸作为模板可得到有3种氨基酸组成的多肽。如以多聚（UUC）为模板，可能有3种起读方式：5′ …UUC UUC UUC UUC UUC…3′或 5′ …UCU UCU UCU UCU UCU…3′或 5′ …CUU CUU CUU CUU CUU…3′分别产生UUC（Phe）、UCU（Ser）或CUU（Leu）.??? 多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种多肽：5′ …GUA GUA GUA GUA GUA…3′或5′ …UAG UAG UAG UAG UAG…3′或5′…AGU AGU AGU AGU AGU…3′由第二种读码方式产生的密码子UAG是终止密码，不编码任何氨基酸，因此，只产生GUA（Val）或AGU（Ser）。 实验6:??? 以随机多聚物指导多肽合成。Nirenberg等及Ochoa等又用各种随机的多聚物作模板合成多肽。例如，以只含A、C的多聚核苷酸作模板，任意排列时可出现8种三联子，即CCC、CCA、CAC、ACC、CAA、ACA、AAC、AAA，获得由Asn、His、Pro、Gln、Thr、Lys等6种氨基酸组成的多肽。 4.1.2 遗传密码的性质 4.1.2.2 密码的普遍性与特殊性 4.1.2.3 密码的连续性 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 4.1.2.4 密码的摆动性 4.2 tRNA tRNA在蛋白质合成中为每个三联密码子翻译成氨基酸提供了接合体，为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供了运送载体，它又被称为第二遗传密码。 三级结构: L形 tRNA的三级结构，都呈L形折叠式，而这种结构是靠二级结构中未配对碱基间所形成的氢键来维持的。tRNA的三级结构与氨酰-tRNA合成酶对tRNA的识别有关。 4.2.2 tRNA的功能 1、起始tRNA和延伸tRNA 有一类能特异地识别mRNA模板上起始密码子的tRNA叫起始tRNA，其他tRNA统称为延伸tRNA。 2、同工tRNA 3、校正tRNA 无义突变：在蛋白质的结构基因中，一个核苷酸的改变可能使代表某个氨基酸的密码子变成终止密码子（UAG、UGA、UAA），使蛋白质合成提前终止，合成无功能的或无意义的多肽，这种突变就称为无义突变。 错义突变：由于结构基因中某个核苷酸的变化使一种氨基酸的密码子变为另一种氨基酸的密码子，这种基因突变叫错义突变。 GGA（甘氨酸） AGA（精氨酸） 错义突变 4.2.4 氨酰-