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- 2019-08-27 发布于浙江
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四个亚铁血红素基团 特点: 每个肽链环绕一个亚铁血红素基团,此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳,血红蛋白有血红素呈红色。 两条α-肽链、 两条β一肽链 组成: 3、血红蛋白由哪些成分组成?有什么特点? 样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定 5、蛋白质的提取和分离包括哪几步? 4、与其他真核细胞相比,红细胞有什么特点? 这一特点对你进行蛋白质得分离有什么意义? 红细胞中的血红蛋白是有色蛋白,分离时可观察颜色判断什么时候收集洗脱液。使分离过程非常直观,简化了实验操作。 (一)样品处理及粗分离 红细胞的洗涤 目的: 去除杂蛋白 过程: 结果: 上清液中无黄色,表明洗涤干净 血红蛋白的释放: 加蒸馏水、甲苯 ,磁力搅拌器搅拌 血样离心、 生理盐水洗涤红细胞、 离心、 重复洗涤三次 思考 分离血红蛋白溶液: 离心管内离心 透析 过程: 原理: 血红蛋白溶液装入透析袋,透析袋放入磷酸缓冲液透析 目的: 除去样品中分子小的杂质 透析袋能使小分子自由进出,而大分子保留在袋内。 (粗分离) 吸出血浆、 思考 (二)凝胶色谱操作(纯化): 2、凝胶色谱柱的装填 装填完毕,立即连接缓冲液洗脱瓶,在50cm高的操作压下,用磷酸缓冲液充分洗涤平衡12小时。使凝胶装填紧密。 1、凝胶色谱柱的制作: 取凝胶浸泡于蒸馏水或缓冲液中充分溶胀后,配成凝胶悬浮液。 填入色谱柱内 3、样品加入与洗脱 待红色的蛋白质
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