第十一章高效液相色谱法.pptVIP

主要内容 本章基本要求 1. 液相色谱法分类 2. 液相色谱仪器基本构成 3. 高效液相色谱法分析条件的选择 4. 反相键合相色谱法原理及特点 5. 梯度洗脱方法特点 6. 液相色谱定性和定量分析方法 作 业 p.219 3，4，5，6，8，9 一、高压输液系统 1.高压泵 要求： 输出压力高 平稳、脉冲小 流量稳定可调 耐腐蚀 LC最重要的部件 2.梯度洗脱装置 低压梯度（外梯度） 高压梯度 （内梯度） 通过改变流动相的组成来调整组分的k值，改变分离因子α值，以达到最短时间内得到最佳分离的目的。 梯度洗脱 ①改善分离 ②缩短分离时间 泵增压 混合 混合 泵输入 按比例 等度洗脱与梯度洗脱 梯度洗脱的特点 ? 改善分离, 加快分析速度； ? 改善峰形, 减少拖尾; ? 可能引起基线漂移 梯度洗脱适用于： 分配比变化范围宽的复杂样品 3.贮液瓶及流动相 1) 对样品有一定的溶解度，以防在柱头产生沉淀。 2) 适用于所选择的检测器。 3) 化学惰性好，以免破坏固定相。 4) 低粘度，增加样品的扩散系数，提高柱效。 5) 纯度高，溶剂不纯会增加检测器噪声，产生伪峰。 对流动相溶剂的一般要求 二、进样系统 准备状态 进样状态 六通阀进样装置 ? 自动进样器 直接进样 进样阀 自动进样器