二苯酮2测定方法.docVIP

PAGE 附件5： 化妆品中二苯酮-2的检测方法 （征求意见稿） 1适用范围 本方法规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中二苯酮-2的方法。 本方法适用于霜、露、乳、液等化妆品中二苯酮-2的测定。 本方法对二苯酮-2的检出限为1.5μg，若取0.1g样品测定，二苯酮-2的最低定量浓度：0.1%。 2方法原理 样品经过溶剂破乳，超声提取后，离心，上清液用液相色谱法测定，以标准曲线法定量。 3试剂和材料 3.1乙腈，色谱纯； 3.2去离子水； 3.3二苯酮-2对照品，纯度?97%； 3.4二苯酮-2标准储备液：准确称取二苯酮-2标准品100mg（准确至0.1mg），置100ml量瓶中。用乙腈分别配置成浓度均为1000μg/ml的标准储备液（1）和100μg/ml的标准储备液（2）。储备液于室温下储存，可使用一周。 3.5二苯酮-2标准工作溶液：用乙腈将上述储备液（3.4）分别配成二苯酮-2浓度为1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、20μg/ml、100μg/ml、150μg/ml的系列标准工作溶液，室温保存，可使用一周。 4仪器 4.1高效液相色谱仪：具有二元梯度泵，紫外检测器。 4.2分析天平：感量0.0001g。 4.3分析天平：感量0.00001g。 4.4高速离心机。 4.5超声波清洗仪。 5测定步骤 5.1样品处理 准确称取混匀样品0.1g，置于100ml容量瓶中，加乙腈：水（90：10）定容，超声处理30分钟；冷却至室温，离心（10000r/min）30min。取上清液作为待测溶液。 5.2测定 5.2.1色谱条件 色谱柱：C18,250mm×4.60mm，5μm； 检测波长：335nm； 流速：1ml/min； 柱温：30℃。 流动相：梯度程序见下表： 流动相的梯度程序 时间（min） 乙腈（%） 水（%） 0.00 3.00 13.00 29.00 38.00 48.00 40 40 100 100 40 40 60 60 0 0 60 60 进样体积：10μl 5.2.2定量测定 用标准工作溶液（3.5）分别进样，以二苯酮-2峰面积为纵坐标，以二苯酮-2浓度（μg/ml）为横坐标进行线性回归，建立标准工作曲线。将处理后的试样（5.1）分别进样，将试样中二苯酮-2峰面积代入标准工作曲线，测得样品溶液中二苯酮-2浓度（μg/ml），按“6计算”，计算试样中二苯酮-2的含量。 5.3平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定，平均偏差不超过10%。 6计算 ρ ρ×V m?1000ω（二苯酮-2） m?1000 式中：ω（二苯酮-2）——样品中二苯酮-2的含量，单位为克每百克（%）； ρ——样品的测得浓度，μg/mL V——样品定容体积，mL； m——化妆品取样量，mg。 7精密度与准确度 多家实验室验证相对标准偏差为0.3~4.2%，回收率为92.5~107.5%。