第三章细胞生物学研.pptVIP

第三章 细胞生物学研究方法 第一节 细胞形态结构的观察方法 第二节 细胞组分的分析方法 第三节 细胞培养、细胞工程与显微操作技术 第一节 细胞形态结构的观察方法 一、光学显微镜技术 二、电子显微镜技术 三、扫描隧道显微镜 一、光学显微镜技术 ①光学放大系统，为两组玻璃透镜：目镜与物镜； ②照明系统：光源、折光镜和聚光镜，有时另加各种滤光片以控制光的波长范围； ③机械和支架系统，主要是保证光学系统的准确配制和灵活调控; 对任何显微镜来说，最重要的性能参数是分辨率，而不是放大倍数。 分辨率(resolving power):指区分开两个质点间的最小距离。这个距离越小分辨本领越高。人眼的分辨力约为100-200μm。 显微镜分辨率的大小取决于光源波长λ，物镜镜口角α（标本在光轴的一点对物镜镜口的张角）和介质折射率N;它们之间的关系是： D＝0.61λ/N.sinα 通常α最大值可达140°，空气中N＝1，最短的可见光波长λ＝450 nm，此时分辨率D＝292 nm，约0.3um。若在油镜下，N可达1.5，D则可达0.2um，所以普通光镜的最大分辨率是0.2 um。 由于N.sinα往往是一定值，要提高分辨力只有采用缩短波长的途径。 普通光镜样品的制备： 样品经过固定剂（如甲醛等）固定后，包埋到包埋剂（如石蜡等）中，然后切成厚约5um的薄切