第17章液相色谱法S.pptVIP

第十七章高效液相色谱法 17-1 概述 高效液相色谱法的特点： 高压、高效、高速、高灵敏度。适用于高沸点、热不稳定及生化试样的分析。 17-2 高效液相色谱仪 一、流程及主要部件 1.流程 高效液相色谱仪一般可分为4个主要部分： 高压输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 还配有辅助装置： 梯度淋洗 自动进样 数据处理等 2.主要部件 (1)高压输液泵 ①压力：150～350×105 Pa。 为了获得高柱效而使用粒度很小的 固定相（10μm，常用3~5μm）， 液体的流动相高速通过时，将产生 很高的压力，因此高压、高速是高 效液相色谱的特点之一。 ②应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可 调、耐腐蚀等特性。 （2）梯度淋洗装置 HPLC有等梯度洗脱和梯度洗脱两种。 前者保持流动相组成、配比恒定。 后者采用两种或多种不同极性的溶剂，在分离过程中按照程序连续改变流动相的浓度配比及极性。 梯度淋洗的作用： 提高分离度 缩短分析时间 提高分析精度 ②外梯度— 低压梯度装置 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的