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第三章 病毒和亚病毒因子;第一节 病毒
一. 病毒的形态和结构;;病毒造成的人类疾病;病毒造成的动植物疾病;病毒的定义及分类;病毒的特征;病毒众生相;典型病毒粒的构造;病毒粒的基本构造和特殊构造;衣壳粒;衣 壳;形成衣壳的意义;包 膜;包膜的功能;刺 突;病毒的核酸;病毒核酸的功能;病毒的对称形式;二十面体对称的结构特征;螺旋对称的结构特征;复合对称的结构特征;病毒的群体形态;蚀(噬)斑测定(plaque assay):以病毒感染性作为病毒数目测定的依据。
在生长的宿主表面,铺上细菌或动物病毒,在单层细胞上形成的蚀(噬)斑,可以认为由单个病毒增殖产生的。由此,可以通过蚀(噬)斑形成单位(pfu)来计算单位体积样品中病毒的数量。;二. 四类病毒的繁殖方式;噬菌体的形态与组成;噬菌体的形态类型;噬菌体的结构;头部——廿面体对称结构;
组成:蛋白质、小肽、多
胺、内含DNA。;尾鞘(tail sheath): 长95nm, 衣壳粒螺旋对称;可伸缩,伸展时24转,收缩时12转。
尾管(tail tube): 长80-100nm,中空,DNA可由此进入细胞。
基板(base plate): 六角形盘状物,中空,其角上有刺突、尾丝。
刺突(spike): 长20nm,有吸附功能。
尾丝(tail fiber): 长140nm,有识别吸附功能,可专一性的吸 附在敏感细胞表面相应受体上。;噬菌体的增殖;噬菌体的增殖;(一)烈性噬菌体的增殖;1. 吸 附;2. 侵 入;3. 增 殖;4. 成 熟;5. 裂 解;快速增殖过程;(三)噬菌体效价的测定;优点:
1) 弥补平板不平
2) 噬菌斑位于同个平面,较清晰
3) 上层为半固体培养基,有利噬菌体扩散;(四)一步生长曲线;一步生长曲线的实验过程;一步生长曲线;潜伏期:是指病毒侵入宿主细胞到病毒粒子释放出胞外前的一段时间。曲线平行于横轴。
潜伏前期又称隐蔽期,是指病毒的核酸侵入宿主细胞后至第一个病毒粒子装配前的一段时间,此时宿主细胞内不含有完整的、有侵染力的成熟病毒粒子。
潜伏后期,病毒粒子装配成熟,胞内具侵染性的成熟病毒粒子数目逐渐增,但没有释放出胞外。寄主细胞的裂解标志着潜伏期的结束。;裂解期:是指宿主细胞迅速裂解,溶液中病毒粒子急剧上升的一段时间。病毒没有个体生长,其宿主细胞裂解也是突发的。
曲线表现为直线上升。
稳定期:是指感染病毒的宿主细胞全部裂解,溶液中病毒效价达到最高点以后的时期。
曲线呈一个平顶。;一步生长曲线的特征数据;一步生长曲线的意义;(五)温和噬菌体与溶源性;温和噬菌体的特点;λ噬菌体的溶原和裂解周期;λ噬菌体的整合过程;溶原性的特点;溶原性的特点;溶原菌的特点;溶原菌的检出;溶源菌独特的噬菌斑形态;三. 植物病毒与动物病毒;---病毒粒子形态螺旋对称
---通过昆虫、伤口等传播途径进入宿主细胞
---核酸主要为ssRNA
---引起花叶、黄化、从枝、枯斑等症状;植物病毒的形态;植物病毒的装配;TMV的装配模式;动物病毒与人类疾病;动物病毒的核酸类型;腺病毒 CAR蛋白(coxsackie/adenovirus receptor)
HIV T-辅助细胞上的CD4
流感病毒A型 黏膜细胞上含唾液酸的糖蛋白
狂犬病毒 神经元上乙酰胆碱 ;动植物病毒的复制周期;吸附:病毒粒子与敏感细胞表面特异性受体的接触、结合的过程。
可逆吸附: 由随机碰撞、布朗运动、静电引力引起。
不可逆吸附: 病毒粒子与敏感细胞表面特异性的化学组分形成牢固的结合,病毒体结构随之发生改变,则吸附病毒不再感染。;左:E.coli phage吸附在E.coli上;右:腺病毒吸附在鸡红细胞上;1)内吞作用:吞入的病毒在吞噬小泡中,与溶酶体结合后释放。
2) 受体介导的内吞作用:受体与病毒(脊髓灰质 炎病毒)多价的相互作用; 引起病毒结构变化,病毒直接穿入,又称为移位。
3) 与细胞膜融合:由包膜病毒具有的细胞融合活 性的包膜糖蛋白介导,核衣壳进入。;左:膜融合 (membrane fusion); 右:内吞作用 (endocytosis);侵 入; 多为受体介导,温度为35~38℃时,在宿主细胞水解酶和热裂解酶作用下,在细胞质内完成。有四种情况:;生物合成;动物病毒的装配和释放;2) 有包膜的RNA病毒装配释放均在细胞质中同步进行,以出芽方式通过细胞膜,包膜同细胞膜。;包膜蛋白插入膜中,
细胞膜出芽方式释放
病毒粒子。;e.g.流感病毒:-ssRNA);
裂解感染
持续感染
潜伏感染;HIV
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