腹舒胶囊对慢传输型便秘大鼠SOM SP的影响及其与结肠肌间神经丛病理变化的相关性.docx

中文摘要腹舒胶囊对慢传输型便秘大鼠SOM、SP的影响及其 中文摘要 腹舒胶囊对慢传输型便秘大鼠SOM、SP的影响及其 与结肠肌问神经丛病理变化的相关性 摘 要 目的：本课题应用大黄建立大鼠的慢传输型便秘模型， 复制了便秘患者服用泻剂后的病理过程，观察了此模型结肠 传输功能、结肠壁病理变化及结肠肌间神经丛生k抑素 (SOM)、P物质(SP)免疫反应性自然恢复情况。通过对 腹舒胶囊的研究，观察治疗组肠道传输功能，结肠壁病理变 化、超微结构变化及结肠壁肌问神经丛生长抑素(SOM)、P 物质(SP)的变化，以及结肠肌问神经丛SOM、SP免疫反 应性的变化与结肠肌间神经丛病理变化的相关性，探讨中医 药对慢传输型便秘预防、治疗的作用机制。 材料与方法 1动物模型制备 1．1动物分组：选用清洁级健康成年SD火鼠72只，雌 雄各半，按照随机化原则分为对照组及大黄组6组。 1．2用药方法：对照组饲以普通饲料：大黄组饲料中添 加有大黄粉，开始剂量为100mg／kg．d，以后每日给予剂量为前 一天的两倍，直至出现半数粪便变稀，然后每天保持此剂量 直至80％的稀便消失，再在此基础上加倍给药，又有近半数 粪便变稀。如此程序循环三次，待最后一次80％的稀便消失 1周后停l}给药，饲以普通软饲料待处理。 2动物处理及分组：大黄模型组动物，随机分为5组， 随机抽取一组与正常组，测定肠道传输率的变化；并用 中文摘要HE染色、嗜银染色、免疫组织化学染色及电镜方法，观 中文摘要 HE染色、嗜银染色、免疫组织化学染色及电镜方法，观 察各组动物结肠壁的病理及超微结构变化。剩余4组动物， 分别采用腹舒胶囊、通便灵胶囊、生理盐水等药物灌胃治 疗2周。测定肠道传输率的变化：用HE染色、嗜银染色、 免疫组织化学染色及电镜方法，观察各组动物结肠壁的病 理及超微结构变化。 3数据处理：本实验计量资料数据均采用x一±s表示， 采用SPSSl0．0统计软件，选用成组设计的单因素方差分 析方法进行统计，检验水准ct=0．05；结肠传输功能结果， 结肠肌问神经丛SOM、SP阳性神经免疫组织化学染色面 密度值结果，提供全部数据，采用SPSSl0．0统计软件， 选用成组设计的单因素方差分析方法进行统计，检验水准 0【=0．05；结肠肌问神经丛SOM、SP阳性神经免疫组织化 学染色半定量结果，检验方法采用成组设计多个样本比较 的秩和检验(Kruskal—Wallis法)及多个样本两两比较的秩 和检验(Nemenyi法)，检验水准0t=0．05。 结果 1本实验大黄模型组动物体重明显低于正常对照组， 治疗组各组动物体重无明显增加，与正常组对比有显著性 差异(p0．05)。各组动物肠道外观无明显差别，结肠粘膜 无色素沉着。 2肠道传输功能：与正常对照组相比，大黄模型组肠 道传输明显减慢(p0．01)：腹舒胶囊1倍量组、腹舒胶 囊3倍量组、通便灵组、自然恢复组肠道传输较大黄模型 组明显加快(P0．叭)：腹舒胶囊1倍量组、腹舒胶囊3 倍量组、通便灵组肠道传输较自然恢复组明显加快 中文摘要(P0．05)；腹舒胶囊1倍量组、腹舒胶囊3倍量组、通 中文摘要 (P0．05)；腹舒胶囊1倍量组、腹舒胶囊3倍量组、通 便灵组肠道传输速度无明显差异。 3光镜和电镜观察结果 3．1光镜(HE染色)：大黄模型组町见：粘膜慢性炎 症：全层大量嗜酸性粒细胞浸润，以固有膜为主；固有膜 水肿，粘膜内大量淋巴小结形成：粘膜下肌部分增厚，胶 原纤维化；肌层胶原纤维增生，肌间神经丛神经细胞空泡 变性，减少。腹舒胶囊1倍量组、腹舒胶囊3倍量组肌问 神经丛神经细胞空泡变性减少；通便灵组、臼然恢复组改 善不明显。 3．2电镜 3．2．1正常对照组：可见到Cajal间质细胞、正常神经 元、平滑肌细胞、有髓及无髓神经。 3．2．2大黄模型组：未找到Cajal问质细胞。神经元、 神经胶质细胞、无髓有髓神经、平滑肌细胞可见十分明显的 退行性改变。可见大量嗜酸性粒细胞浸润。 3．2-3腹舒胶囊1倍量组、腹舒胶囊3倍量组：神经髓 索水肿减轻；平滑肌细胞密体增多；神经胶质细胞病变减轻。 3．2．4通便灵组、自然恢复组：神经元、神经胶质细胞、 平滑肌细胞可见明显的退行性变。 4免疫组织化学结果 4．1 SOM、SP免疫组化染色半定量分析结果：大黄模型 组免疫反应性较正常对照组明显降低(P0．01)：腹舒胶囊 1倍量组、腹舒胶囊3倍量组免疫反应性较大黄模型组、 通便灵组及自然恢复组均明显增高(P0．05)；腹舒胶囊3 倍量组与腹舒胶囊1倍量组相比，免疫反应性无明显差异 中文摘要(P0．05)；通便灵组、自然恢复组与大黄模型组对比， 中文摘要 (P0．05)；通便灵组、自然恢复组与大黄模型组对比， 免疫反应性无明显差异(P0．05)。 4．2对SOM、SP