第14章RNA的生物合成简明教程.pptVIP

以大肠杆菌为例 全酶：分子量为480 kD，由五种亚基组成α2ββ′ω σ ， 去掉σ亚基称为核心酶 ω 亚基的功能还不清楚。 原核生物RNA聚合酶结合到DNA的启动区开始转录，靠σ亚基辨认启动区，启动RNA的合成。 启动子（promoter，也称启动基因）是指RNA聚合酶能识别、结合和开始转录的一段DNA序列。启动区具有共有的序列称为保守序列或一致性序列。 原核生物中转录起始区的共同序列 E. coli的转录起始 三、转录的延伸 终止因子：指协助RNA聚合酶识别终止子的辅助因子（蛋白质），如ρ因子 ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质，亚基分子量46kD。 ρ因子能结合RNA，对polyC的结合力最强。 ρ因子还有NTP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。 第三节、真核生物的转录过程 真核生物的转录过程比原核复杂。二者的转录起始过程有较大区别，转录终止也不相同。 真核生物具有3种不同的RNA聚合酶: 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化。转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 三、延伸 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似，但因有核膜相隔，没有转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 四、终止 真核生物的转录终止，和转录后修饰同时进行。 真核生物mRNA有聚腺苷酸(poly A)尾巴结构，是转录后才加进去的。 转录不是在poly A的位置上终止，而是超出数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。已发现，在读码框架的下游，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列。这些序列称为转录终止的修饰点。 第三节 转录后加工（修饰） 由转录生成的RNA分子是初级RNA转录产物(primary RNA transcript)，几乎所有的初级RNA转录物都要经过加工，才能成为具有功能的成熟的RNA。 加工主要在细胞核中进行。 一、mRNA的转录后加工 （一）真核生物mRNA转录后加工 大多数真核mRNA的5’-末端有7-甲基鸟嘌呤的帽结构 (m7GpppG)，由三磷酸酶、鸟苷酸转移酶（加帽酶）和甲基转移酶催化生成。 意义：可以保护mRNA免遭核酸酶的水解；也能与蛋白质结合，促进mRNA与核糖体的结合，启动蛋白质的生物合成。 三、rRNA的转录后加工 原核生物：16S、23S和5S rRNA都来自于一个30S rRNA前体，前体两端及各rRNA之间的间隔RNA需在加工中除去。 真核生物：18S、28S和5.8S rRNA都由45S的前核糖体RNA经过转录后加工形成的，绝大多数5S rRNA是独立转录的。 第四节 RNA复制 3、碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 2、依赖ρ因子的转录终止 ρ因子： a、ρ因子与RNA结合（终止子上游的某一处） b、ρ因子沿RNA从5’→3’移动（NTP水解供能） c、ρ因子与RNApol相互作用而造成转录的终止 ρ因子对终止子的作用 无连续 U串 G/C含量较少 ?因子：水解各种核苷三磷酸促使新生RNA链从三元转录复合物中解离出来，从而终止转录。 ρ结合上来追赶RNApol ρ追赶上来（暂停） ρ与RNApol相互作用使杂交链解链 终止子 RNA聚合酶Ⅰ（RNA PolⅠ） RNA聚合酶Ⅱ（RNA PolⅡ） RNA聚合酶Ⅲ（RNA Pol Ⅲ） 三种RNA聚合酶专一地转录不同的基因，其转录过程和产物各不相同。三种RNA聚合酶对鹅膏蕈碱的敏感性反应不同。 一、真核生物的RNA聚合酶 真核生物的RNA聚合酶 中度敏感 极敏感 耐受 对鹅膏蕈碱 核质 核质 核仁 在细胞内的分布 tRNA和 5S rRNA mRNA(hnRNA)及一些特殊的RNA rRNA（ 5.8S, 18S, 28S） 所合成的RNA前体 RNA pol III RNA pol II RNA pol I 种类 二、转录起始 转录起始需要启动子 、RNA聚合酶和转录因子的参与，不同RNA聚合酶有其特异的启动子及特定的转录因子。 真核生物启动子的结构 核心启动子（core promoter） 上游启动子元件（upstream promoter element，UPE） 核心启动子:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 作用：选择正确的转录起始位点，