选修一专题2微生物的培养与应用.pptVIP

3．(2011·青岛质检)微生物与人类关系密切。虽然有些微生 物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的。请 回答下列问题。 (1)培养微生物的培养基配方中一般含有水、碳源、氮源 和无机盐。从土壤中分离分解尿素的细菌时，培养基中 加的唯一氮源为________，这种培养基称为__________ 培养基。 (2)在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的倒平板操作时，平 板冷凝后，为什么要将平板倒置？________________。 (3)微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和 ________ 法。在用平板划线法接种时，为什么在操作的 第 一步以及每次划线之前都要灼烧接种环 _________________________________________________。 在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么 _________________________________________________。 解析：从土壤中分离出分解尿素的细菌，需用选择性培养基，唯一的氮源是尿素。接种过程中，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法两种方法。每次划线前都要灼烧接种环的目的是杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落。操作的第一步和最后一步需灼烧接种环的目的分别是防止接种环上有其他微生物而污染培养基、以免菌种对环境造成污染和感染操作者。 答案：(1)尿素　选择　(2)皿盖上会凝有水珠，防止水珠落入培养皿造成污染，还可使培养基表面的水分更好地挥发 (3)稀释涂布平板　第一步灼烧接种环是防止接种环上有其他微生物而污染培养基。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次接种时留下的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来自上次划线的末端，以便通过多次划线后，得到单个的菌落　(4)需要，以免菌种对环境造成污染和感染操作者 [示例]　下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验，完成下列问题： (1)实验原理：农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。 将用表层土制成的稀泥浆，接种到无氮培养基上进行培养。 在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方 法，可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。材料用具：农 田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基，盛9 Ml 无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。 (2)方法步骤： ①倒平板：分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平 板，操作过程应在火焰旁。 ②制备土壤稀释液：取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥 形瓶中，充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL，转至9 mL 的无菌水的大试管中，依次稀释到107稀释度。 ③涂布：按照由107～103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行 平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布 ________个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板。 ④培养：放入恒温箱内，在28～30℃下培养3～4天。 ⑤细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在 ________________ 的平板进行计数。如果测试的平均值 为50，则每克样品中的菌落数是________。(稀释度是105) (3)预测结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基平板上 的菌落数应多于无氮培养基上的数目。请说明原因。 [解析]　分离自生固氮微生物，应用无氮培养基，因为氮是生物必需的元素，只有具有固氮能力的自生固氮微生物才能在无氮培养基上生长。而营养全面的牛肉膏蛋白胨培养基则允许多种微生物生长。 [答案]　(2)③3　⑤30～300　5×107 (3)无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌，而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存。 1．筛选菌株的原理 在选择培养基的配方中，把尿素作为培养基中的唯一氮 源，只有能够利用尿素的微生物才能够生长；把纤维素 作为培养基中的唯一碳源，只有能够利用纤维素的微生 物才能够生长；无氮源的培养基上，只有自生固氮菌才 能够生长。 2．统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微 镜下计算一定容积的样品中微生物数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。 (2)间