实验RNA提取方法及原理.pptVIP

实验一、RNA提取方法及原理 一、研究背景 二、方法及原理 一、研究背景 1. RNA研究的重要性 DNA，RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子，是生命现象的分子基础。 DNA的遗传信息决定生命的主要性状，而mRNA在信息传递中起很重要的作用。其它两大类RNA，rRNA和tRNA，同样在蛋白质的生物合成中发挥不可替代的重要功能。因此mRNA、rRNA、tRNA在遗传信息由DNA传递到表现生命性状的蛋白质的过程中举足轻重。 2 RNA分布 二、方法及原理 1 、 RNA的提取流程 （1）样本前处理 （2）细胞裂解 （3） RNA的纯化及获得 RNA提取流程－－ 样品前处理注意点 RNA提取流程－－细胞裂解，以释放RNA 异硫氰酸胍/酚－TRNzol总RNA提取试剂 RNA提取流程－－ RNA的纯化及获得 2. RNA提取的注意事项 杜绝外源酶的污染 a.严格戴好口罩，手套。 b.实验所涉及的离心管，Tip 头，移液器杆，电泳槽，实验台面等要彻底处理。 c.实验所涉及的试剂/溶液，尤其是水，必须确保 RNase-Free。 阻止内源酶的活性 a.选择合适的匀浆方法。 b.选择合适的裂解液。 c.控制好样品的起始量。 明确自己的抽提目的 a.任何裂解液系统在接近样品最大起始量时，抽提成功率急剧下降。