动物营养学自由基对动物机体的氧化损伤与抗氧化剂的修复作用研究教材.ppt

自由基对动物机体的氧化损伤与抗氧化剂的修复作用研究 徐建雄 上海交通大学农业与生物学院 主 要 内 容 自由基生物学概论 营养物质与自由基的关系 抗氧化剂对氧化损伤的修复作用 氧化应激对畜牧业的危害与干预 展望 自由基生物学概论 自由基的研究主要集中医学和食品科学领域： 自由基与疾病、衰老、抗氧化食品、保健食品 1、自由基的概念 是指任何包含一个或多个未成对电子并能独立存在的原子或基团。 自由基生物学概论 常见的自由基有： 活性氧(ROS)： 氢自由基、超氧阴离子、羟自由基、烷过氧基、烷氧基、氢过氧基、单线态氧等 活性氮(RNS)： 在NO合成酶(NOS)的作用下，精氨酸分解为NO。一氧化氮、过氧亚硝酸离子等 自由基生物学概论 2、自由基的产生　 （1）产生的主要途径： 酶促反应： 黄嘌呤氧化酶、NADPH氧化酶、醛氧化酶、谷胱苷肽还原酶、二氢乳酸脱氢酶等 非酶促反应： 通过以自由基作为引发剂启动引发的连锁反应 自由基生物学概论 2、自由基的产生　 （2）其他途径 辐射分解和光化学作用： 如经紫外光、X射线或γ射线照射 金属催化反应： 如过氧化氢同铁离子反应生成羟基自由 炎症等病变过程中，嗜中性粒细胞或巨噬细胞会产生ROS 外源性物质进入体内也会产生大量自由基： 如肾上腺素、四氯化碳、乙醇等会诱导机体产生-CCl3和羟自由基 日粮中一些营养素的缺乏 自由基生物学概论 4、自由基的作用　 （1）促进作用： 参与脂肪加氧酶产物的生成 胶原蛋白的合成 增强肝脏的解毒作用 凝血酶的合成 参与调节细胞增殖与分化 维持正常的氧化代谢过程等 自由基生物学概论 4、自由基的作用 （2）氧化损伤 对DNA的损伤 对蛋白质的损伤 对细胞膜的损伤 ——对DNA的损伤 碱基损伤 活性氧攻击DNA的靶位点是腺嘌呤与鸟嘌呤的C8，嘧啶的C5与C6双键。 ①氧自由基直接作用于双键部位，使之获得一个加合基而改变其结构。 ②·OH使脱氧核苷脱嘌呤，即自由基可使DNA链上出现无嘌呤或无嘧啶部位。 ③·OH可以自动从胸嘧啶的甲基中除去H原子。 ——对DNA的损伤 ——对蛋白质的损伤 对脂肪族氨基酸氧化损伤最常见的途径为： 在α-位置上将一个氢原子除去，形成C—中心自由基，再加氧其上，生成过氧基衍生物。后者分解成NH3及α-酮酸，或生成NH3、CO2与醛类或羧酸，破坏脂肪族氨基酸的结构。 芳香氨基酸很少出现α-除氢，而多出现羟基衍生物。后者可将苯环打开或在酪氨酸处交联成二聚体。 由过渡金属介导出现氧化损伤，主要通过Fenton反应。其损伤特点为部位特异性。因为，在蛋白质结构内只有某个或几个金属结合部位的氨基酸受到影响。 脂质过氧化的自由基中间产物作用，如烷氧自由基(LO·)和过氧自由基(LOO·)，可与过氧化脂质紧密联系的蛋白质反应。 对细胞膜的损伤 脂质过氧化(lipid peroxidation) 细胞膜和细胞器膜中含有大量不饱和脂肪酸侧链，易被自由基氧化，发生脂质过氧化，对生物膜具有强烈的破坏作用 判断机体自由基损伤的程度 测定自由基伤害的指标：当脂质、蛋白质及DNA被自由基氧化後，会产生某些特定物质，并释放到血液及尿液中，经由抽血、验尿可以知道细胞受伤害的情形。 测定自由基释放量：利用电子自旋共振光谱仪，或化学冷光测定，侦测体内的自由基。 测定抗氧化剂： a.在血液中加入氧化剂，测定自由基的释放量。 b.测定抗氧化剂含量 c.抗氧化扫描仪 (Biophotonic Scanner)：利用雷射光射入电子，利用雷射光射入电子，可测定皮肤下胡萝卜素，胡萝卜素是人体重要的抗氧化剂之一。 营养物质与自由基的关系 1.营养物质是自由基产生的物质基础 氨基酸/蛋白质：一氧化氮合酶的生物合成需要氨基酸、核黄素、嘌呤等物质 营养物质与自由基的关系 脂肪酸：摄入过高的PUFA可使机体产生脂质过氧化反应 维生素：通过抑制iNOS基因的表达而抑制NO的产生，如维生素A可抑制心血管平滑肌细胞、内皮细胞、心肌细胞和肾细胞中iNOS基因的表达 矿物质：Fe2+参与自由基的生成，主要通过催化Fenton反应,参与氧化酶的构成，构成自由基反应链中的电子传递系统而起作用。Fenton反应可产生毒性很强的·OH。 Se:当Se缺乏时导致Se-GSH-Px活性降低，其降解体内代谢过程产生的内源性的H2O2和ROOH能力减弱，引起PUFA过氧化而直接损害膜结构。 铜：催化自由基反应。 氟：·OH和 的产生依赖于氟的浓度；而在高氟时主要产生 自由基。 营养物质与自由基的关系 2.营养物质是动物体内清除自由基的物质来