乳与乳制品非常规理化指标检验食品及饲料中黄曲霉毒素B1的检测.doc

乳与乳制品非常规理化指标检验食品及饲料中黄曲霉毒素B1的检测 YLNB 5.2 酶联免疫法 1. 仪器及器材 1.1 恒温摇床：20-25℃ 1.2 天平：精度0.1 g 1.3 混匀器 1.4 酶标仪：内置450 nm滤光片 1.5 针式打印机 1.6 小型粉碎机 1.7 酸度计：（pH7-9） 1.8 移液器：50 μL，100 μL，300 μL（多道），1000 μL 1.9 吸头：50 μL，100 μL，300 μL，1000 μL 1.10 快速定性滤纸：直径：10 cm ，11cm 1.11 漏斗 1.12 研钵 1.13 具塞锥形瓶 150 mL若干 1.14 烧杯：1000 mL 1个 1.15 冰箱：0-4℃ 2. 试剂 2.1 黄曲霉毒素B1测定试剂盒：按说明储藏 2.2 甲醇:分析纯 2.3 安替福民（有效氯大于10 %）：分析纯 2.4 去离子水 3. 方法 3.1 样品前处理： 样品粉碎后称取5.0 g，加入具塞锥形瓶中，准确加入25.0 mL甲醇-水（70+30）溶液，盖塞后封严，强力振荡3 min。用快速定性滤纸过滤，取1 mL 滤液，用1 mL 蒸馏水稀释，取50 μL 稀释液进行分析。 3.2 操作步骤：按试剂盒提供的操作说明进行。 3.3 实验过程中所有接触过黄曲霉毒素标准物品（包括废弃物与废水），都要经过pH = 7.0, 10 %（v/v）的次氯酸钠溶液浸泡过夜，作无害化处理。反应停止液为1mol/L 硫酸，避免接触皮肤。