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液相色谱柱的应用 主讲人: 李效宽 日 期: 目 录 一、 HPLC分离原理 样品组分在流动相和固定相之间进行分配，由于不同组分在流动相和固定相之间的交互作用能力(吸附.分配.离子交换.分子尺寸等)不同，使得不同组分在色谱柱上的移动速率不一样，从而产生色谱分离。(必要条件) 分配过程 分配系数 - K K= K= 常数 （T恒定） Cm =组分在流动相中的浓度 Cs = 组分在固定相中的浓度 容量因子k 色谱理论：塔板理论--柱分离效能指标 色谱理论：速率理论--影响柱效的因素 速率理论是荷兰学者范·弟姆特于1956年提出的, 表述了影响柱效的因素及提高柱效的多种途径，其核心是速率方程（也称范·弟姆特方程式）。 速率方程　　　H = A + B/u +C·u H：理论塔板高度； u：流动相的线速度 色谱理论：速率理论--影响柱效的因素 H = A + B/u +C·u 色谱理论：分离度 样品组分的分离 色谱柱的构造 .色谱柱管 常用内壁抛光的不锈钢管作色谱柱的柱管以获得高柱效。使用前柱管先用氯仿、甲醇、水依次清洗，再用50%的HNO3对