中低压层析工艺的开发及应用举例101019.ppt

* これは各ゲルのサイクル時間を表したもの。 Butyl-600Mでは1サイクルで回収できる抗体量は多いものの長い時間を要していることがわかる。 * 結果を表にまとめたもの。 1回のサイクルでの回収量とサイクル時間を考慮して、時間あたりの処理量を示している。 1回のサイクルで終了する場合であればButyl-600Mが有効。何回もサイクルを重ねて、連続的に精製を行う工程であればPPG-600Mが有効であることがわかる。 それらの目的に応じても担体の選択を行うことが必要。 * * * * * 結果を表にまとめたもの。 1回のサイクルでの回収量とサイクル時間を考慮して、時間あたりの処理量を示している。 1回のサイクルで終了する場合であればButyl-600Mが有効。何回もサイクルを重ねて、連続的に精製を行う工程であればPPG-600Mが有効であることがわかる。 それらの目的に応じても担体の選択を行うことが必要。 * 結果を表にまとめたもの。 1回のサイクルでの回収量とサイクル時間を考慮して、時間あたりの処理量を示している。 1回のサイクルで終了する場合であればButyl-600Mが有効。何回もサイクルを重ねて、連続的に精製を行う工程であればPPG-600Mが有効であることがわかる。 それらの目的に応じても担体の選択を行うことが必要。 * * 3ステップによう精製のイメージです。 初期のキャプチャーステップでは大量の試料を処理する必要があり、大型カラムが使用される。 中間精製ステップでは、主要な不純物を除去、さらに最終精製ステップで、精製純度を上げる。 初期のステップでは、主にクルードなサンプルを大雑把に分離し、濃縮を目的にしているため、担体には大きな粒子径のものが使用され、ステップが進むにつれ、精密な精製が要求されるため、小さな担体の粒子径が使用される。 * Analyzing the steps in this platform leads to the following conclusions. Protein A is an effective Capture Step and can easily be incorporated into any MAb purification platform The cation exchange step is utilized for removal of nucleic acids (flow through column), some Protein A (from leachate) , and other minor impurities that were not removed in the Capture step. The HIC step is used because it is so powerful in removing residual Protein A and Protein A fragments, as well as aggregates and mis-folded MAb that are not removed from the first two steps. * A recent example of the power of Platform chromatography was described by Dr. Tim Tressel of Amgen Corporation. This slide was adapted from his talk that he gave at the 12th Conference on Antibody Production and Downstream Processing, earlier this year. He used two different Mabs and designed a platform that works as follows: Protein A was used as the capture step, as indicated for the reasons given on the previous slide. In the second step, Toyopearl SP-650M was used, although with slightly different gradient slopes. Finally, HIC was used for the last step, however the choice of HIC resin was changed. Probably this change was r