生物化学中英双语版课件14RNA的合成转录和加工.pptVIP

生 物 化 学 原 理Principles of Biochemistry 杨 帆 fan_yang@zju.edu.cn 第十四章 RNA的合成：转录和加工 DNA的转录 转录后加工 逆转录 DNA的转录 转录transcription：指遗传信息从DNA转移到RNA的过程，即以DNA为模板，由依赖DNA的RNA聚合酶催化RNA合成的过程。 参与转录的各因素： 原核生物转录的过程： 原核生物转录的过程： 2. 转录的起始： RNA聚合酶到达转录起始点，开始催化核苷三磷酸按照模板链上的碱基顺序合成RNA。此时σ亚基从全酶上脱离下来，解离后的σ亚基再与另一个核心酶组成全酶开始下一轮转录。 3. RNA链的延伸：转录泡延着模板链3’ ? 5’方向不断移动，转录泡内RNA链的5’端方向10－12个核苷酸始终与模板链形成杂合体。 4. 转录的终止：当RNA聚合酶达到终止子时，RNA转录将终止 真核生物的转录： 真核生物含有三种RNA聚合酶，根据它们对于α-鹅膏蕈碱 敏感度的不同，分为RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ。 真核生物的RNA聚合酶不能直接识别启动子起始转录，必须在其他的转录因子的帮助下开始转录。 真核生物DNA含有复杂的转录调控结构 转录后加工 在体内，尤其是真核生物体内，由DNA直接转录合成的RNA大多数要经过一系列的后加工才能生成成熟的RNA的过程，称为转录后加工。 原核生物体内的RNA后加工：原核生物的mRNA通常一经转录即进行翻译，大多不进行转录后加工。但tRNA和rRNA都要在转录后经过一系列加工才能成为有功能的分子。 真核生物体内RNA的转录后加工：真核生物体内的tRNA和rRNA和原核生物有些类似，但真核生物的mRNA前体必须经过复杂的加工过程。 逆转录 逆转录：是指以RNA为模板合成DNA的过程。，催化逆转录反应的酶称为逆转录酶，也称为RNA指导的DNA聚合酶。 Summary DNA的转录：原核生物中DNA的转录过程 转录后加工：tRNA, rRNA, mRNA的转录后加工 真核生物中mRNA的转录后加工：断裂基因，外显子，内含子 逆转录的概念 真核生物mRNA 5’端“帽”结构 真核生物mRNA 5’端加“帽”过程 鸟苷酰转移酶 磷酸水解酶 鸟嘌呤-7-甲基转移酶 2’-O-甲基转移酶 （2） 3’端加polyA 尾： AAUAAA：最主要的polyA信号 Poly A聚合酶 内切酶 （3） 内含子的剪切：大多数真核基因是断裂基因，其转录产物中同时含有内含子（插入序列）和外显子（编码序列）。在mRNA的后加工过程中，将通过拼接（splicing）去除内含子，使外显子成为连续序列。 真核生物的mRNA剪切 外显子 内含子 初级转录物 中间体 剪接的RNA 内含子 外显子 真核生物的mRNA剪切模式（1） 2’,5’-磷酸二酯键 真核生物的mRNA剪切模式（2） 相同的转录产物，不同的剪接方式，最终可生成不同的蛋白质 降钙素 甲状腺 脑 降钙素基因相关肽 真核生物mRNA剪切举例 卵清蛋白 * * 1. 依赖DNA的RNA聚合酶： 作用特点： （1）以4种核糖核苷三磷酸作为底物，反应需要Mg2＋的参与 （2）需要适当的DNA作为模板 （3）合成的RNA链方向也为5’?3’ （4）反应无需引物，直接以DNA为模板合成新的RNA链 （5）RNA聚合酶无校对功能 依赖DNA的RNA聚合酶催化的转录是不对称的： 在体内转录过程中，DNA双链中只有一条链或者某个区段作为模板进行转录。参与转录的DNA链被称为模板链（反义链），而另一条链则被称为编码链（正义链）。RNA含有与编码链几乎完全相同的碱基序列，除了以U代替T以外。 E.Coli RNA聚合酶：含有α2β β ’σω亚基，其中α2β β ’构成核心酶，负责转录过程中RNA链的延伸。 起始亚基，为转录起始所必需 功能未知 E.Coli RNA聚合酶的三维构像图 2. 转录单位：RNA链的合成是从模板特定的部位起始的，经过链的延伸终止于特定的模板部位。一般将从转录起始点到转录终止点的整个区域称为转录单位。 参与转录的各因素： 参与转录的各因素： 3. 启动子结构：启动子是指RNA聚合酶识别、结合并由此启动转录的一段DNA序列，位于转录起点的5’端上游区，启动子本身一般是不被转录的。 E. Coli 中的两个启动子序列： -10序列（Pribnow框）：TATAAT -35序列（识别序列）：TTGACA E. Coli 中不同基因的启动子序列 -10序列（Pribnow框） -35序列（识别序列） -35序列（识别序列） 转录的起始 1. 模板的识别和转录泡的形成： σ亚基 转录泡结构 RNA聚合酶 模板链 非模板链 转录的进行 终止子：具有终止功能的特定的DN