冻干人纤维蛋白原制造及检定规程.doc

冻干人纤维蛋白原制造及检定规程 本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血浆中分离、提纯、冻干并经病毒灭活处理制成。主要成份为纤维蛋白原，纯度在70%以上。含适量枸橼酸钠、氯化钠和葡萄糖作为稳定剂。不含防腐剂，专供静脉输注用。用于治疗产后大HYPERLINK \o 书籍相关：出血 出血及因大手术、外伤或内HYPERLINK \o 书籍相关：出血 出血等引起的纤维蛋白原缺乏而造成的凝血障碍。 1　制造 1.1　制造要求 1.1.1　对血浆的要求 1.1.1.1　血浆应符合《原料血浆采集（单采血浆术）规程》要求 新鲜分离的液体血浆或冰冻血浆，去除冷沉淀以及凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ后的血浆，均可用于生产。 1.1.1.2　分离后的血浆应保持无菌，否则应及时投料制造或低温水冰冻保存。冰冻保存期最长不应超过2年。 1.1.2　对制造工作室、设备及原材料的要求 与《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.1.3～1.1.4项要求相同。 1.2　制造工艺 1.2.1　采用低温乙醇法提制，并经卫生部批准的适宜方法进行病毒灭活处理。 1.2.2　分批 同一容器混合溶解的制品作为1批，不同机柜冻干的制品分别作为亚批。 1.2.3　溶解液及稳定剂的规定 溶解纤维蛋白原沉淀用的溶解液所含的稳定剂应符合下列规定： 枸橼酸三钠（2H2O）　1.2%（g/ml） 注射用葡萄糖5%（g/ml） 氯化钠0.85%（g/ml） 1.2.4　除菌过滤及分装 制品可直接滤入无菌的成品瓶内，每瓶纤维蛋白原装量应不少于出品规格。 1.2.5　冻干 过滤分装后应立即冻结，　并按《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》1.2.5项的规定进行冻干，在冻干全过程中，制品温度不应超过35℃。 1.2.6　半成品检定 半成品应抽样做理化检查及热原质试验，并按亚批做无菌试验。 1.3　剂型与规格 为冻干剂型，每瓶成品含纤维蛋白原0.5、1.0、1.5或2.0g。 2　成品检定 2.1　抽样 每批成品应抽样作全面质量检定，不同机柜冻干的制品应分别抽样做无菌及水分检定。 2.2　物理检查 2.2.1　外观 应为灰白色或淡黄色疏松体，无融化迹象。重溶后，溶液应澄明或轻微乳光，允许有少量细小絮状物或蛋白颗粒。 2.2.2　真空度 以高频火花真空测定器检测，瓶内应出现蓝紫色辉光。 2.2.3　溶解时间 制品温度应先平衡至30～37℃，按瓶签标示量加30～37℃注射用水，为约1%蛋白浓度溶液，制品应在30分钟内完全溶解。 2.3　化学检定 按《生物制品化学检定规程》进行。 2.3.1　pH值 取2.2.3项下溶液测定，pH值应为6.8～7.8。 2.3.2　水分 水分含量应≤5%（g/g）。 2.3.3　纯度 取2.2.3项下溶液，用生理盐水稀释至每ml含纤维蛋白原2～3mg，用钨酸沉淀法测定蛋白含量。 另取上述稀释液10ml，加入每ml含0.3IU凝血酶溶液10ml，搅匀待凝固后，置一盛水的盘内加罩密封。在室温放置1～2小时。移置2～10℃过夜。然后搅碎凝块，离心（或过滤）分离清液。用钨酸沉淀法测定其残余蛋白量，按下式计算制品的纯度，应不低于70%。 纤维蛋白原制品纯度（%）=（蛋白总量—残余蛋白量）/蛋白总量×100 2.3.4　纤维蛋白原含量 根据2.3.3项的测定结果，按下式计算纤维蛋白原含量，应不低于出口规格。 纤维蛋白原含量（g）=蛋白总%（g/ml）×制品纯度%×总体积（ml）。 2.3.5　枸橼酸离子测定 取2.2.3项下溶液测定，枸橼酸离子含量应为1.1%～1.3%（g/ml）。 2.3.6　葡萄糖含量 应为4.5%～5.5%（g/ml）。 2.3.7　氯化钠含量 应为0.8%～0.9%（g/ml）。 2.4　凝固活力测定 于小试管内加入凝血酶溶液（3IU/ml）0.5ml，置37℃水浴预热1分钟，再中入2.2.3项下的溶液。用生理盐水稀释成每ml含3mg纤维蛋白原，加0.5ml，摇匀。置37℃水浴中观察其凝固时间。两次测定结果平均值应不超过60秒。 2.5　无菌试验 按《生物制品无菌试验规程》进行。 2.6　安全试验 2.6.1　豚鼠试验 用体重300～400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射检品5ml（约1%蛋白浓度），注射后半小时内动物不应有明显异常反应，观察7天，动物均健存，每只体重增加者判为合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠复度，判定标准同前。 2.6.2　小白鼠试验 用体重18～20g小白鼠5只，每只腹腔注射检品0.5ml（约1%蛋白浓度），半小时内动物不应有明显的异常反应，继续观察7天，动物均健存，每只体重增加者判为合格。如不符合上术要求，用10只小白鼠复试一次，判定标准同前。 2.7　热原质试验 按《生物制品热原质试验规程》进行。注射剂量按家兔每kg体重注射30