酶活性浓度的测定技术.PPTVIP

第六章  诊 断 酶 学 [掌握]血清酶的分类、生理变异、病生机制等，同工酶及其亚型测定，临床诊断中常用的血清酶及其同工酶，重要血清酶的测定、原理及评价 。 [熟悉]酶的有关酶基本知识，酶活性浓度的测定技术及酶的免疫化学测定 。 2、连续监测法（动力学法、速率法） 四、工具酶 工具酶：酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶。 指示酶和辅助酶作为反应系统中的试剂。 （一）工具酶 （二）常用工具酶 常用工具酶多为氧化还原酶类 工具酶纯度不必要求过高 工具酶中杂质的含量有一定的限制 P152 （三）工具酶参与的指示反应 临床生化检验中，很多项目的测定往往使用有工具酶参与的类似的反应原理－－共通（通用）反应途径。 1. 偶联H2O2的工具酶及其指示反应 葡萄糖 尿酸 胆固醇 甘油 丙酮酸 葡萄糖氧化酶 尿酸氧化酶 胆固醇氧化酶 甘油氧化酶 丙酮酸氧化酶 H2O2 以H（e）为受体的指示酶 以NAD(P)H为辅酶参与的指示酶 触酶 POD (最常用） P152 2H2O2+4-AAP+酚 醌亚胺(红色)+4H2O POD 例：葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 Glu＋O2＋H2O GA＋H2O2 H2O2＋4-AAP＋酚 H2O＋O2＋红色醌类化合物 GOD P