赤潮毒素检测作业指导书.doc

赤潮毒素检测作业指导书 1.贝类样品的采集 a)样品应采于赤潮发生区的水域或滩涂，选择人工养殖品种和野生经济食用种类； b)采样量应足以提供制取100g以上的组织匀浆量。此外，另采集10个个体，用70%酒精溶液或5%的甲醛溶液固定，以供分析胃内含物； c)依采集地点和品种，分别将样品置于冰柜中，投入注明采集地点、时间和品种的标签； d）采得的样品应尽快带回实验室及时处理，否则应放入冰箱保存。 2.试样的制备 a)打开贝壳，将软组织和体液取出，用剪刀减碎，取100g以上的量置于组织匀浆器中匀浆； b）称取100.0g匀浆样，置于500ml烧杯中，加入100ml盐酸溶液，充分搅拌。然后用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调PH为3~4； c）将此烧杯置水浴中煮沸5min，冷却至室温，再调节PH为2~4，后用盐酸溶液定容至200ml； d）若组织样品不足100g，可按1g组织得2ml的上述处理样进行制备； e）将处理的样品离心，离心速度3000r/min，离心时间5min。之后，小心倾取上清液，即是贝毒的抽提液，置冰箱备用。 3.检测步骤 3.1空白试验 取2~3只小白鼠，在其腹腔处分别注入1ml盐酸溶液，若1h内无死亡，即可进行毒性试验。 3.2毒性试验： a)先进行预实验，以判断提取液毒性强弱。取2~3只小白鼠，在每只的腹腔内注射提取液1ml，若小白鼠在4min内死亡，可依死亡时间查出相应的鼠单