现代分子生物学蛋白质.pptVIP

量子点：因亮度和光稳定性非常高，可反复成像 很难在活体细胞内对量子点标记的胞质蛋白进行观测 免疫靶向的抗生物素蛋白链菌素标记的量子点 （immunotargeted streptavidin-QDs） 荧光标记技术在蛋白质构象改变研究中的应用研究蛋白随时空间改变而发生构象改变时，最常用方法是将某一蛋白质结 构域与2个荧光基团结合，然后对该结构的萤光共振能量转移（FRET） 进行检测 常用荧光基团有CFP、YFP等 FRET 传感器：底物经修饰（橙色，磷酸化修饰）导致构象改变，通过 FRET使发青色荧光的CFP发黄色荧光 FRET效率取决于供体与受体间的距离和方向 FRET反映蛋白分子内部因方向而不是距离改变所造成的构象改变，因为荧 光蛋白分子中有一个发生交替排列或者接头长度发生微小的改变都会 给FRET带来很大的影响，这要比2个荧光蛋白分子间的距离改变对FRET 造成的影响大得多 连接2个荧光蛋白的蛋白质在生化信号的影响下改变构象 如果与定位信号序列融合，这种结构可用于对胞内特定的亚细胞结构研究 荧光共振能量转移（Fluorescence Resonance Energy Transfer，FRET） 当一个荧光分子(供体分子)的荧光光谱与另一个