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基因进入受体细胞的载体 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 作为载体没有切割位点将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉? 如果载体对受体细胞有害将怎样? 1972年,科学家首次用一种限制酶切割猿猴病毒SV40的DNA和λ噬菌体DNA分子,然后使用DNA连接酶进行连接,形成了重组的DNA分子. 四、基因工程的诞生 1973年斯坦福大学的科学家进一步实现了细菌之间的性状转移. 同一种限制性核酸内切酶 猿猴病毒SV40的DNA R噬菌体的DNA DNA连接酶 重组DNA分子 1972年,美国斯坦福大学的科学家合成第一个人工DNA重组产物 同一种限制性核酸内切酶 大肠杆菌的含四环素 抗性基因的质粒 大肠杆菌的含卡那霉素 抗性基因的质粒 DNA连接酶 重组质粒 1973年,美国斯坦福大学的科学家,第一个基因工程的诞生 大肠杆菌 (抗四环素和卡那霉素) 1)以下说法正确的是 ( ) A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来 C 练习 在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( ) 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 A .有关基因工程的叙述中,错误的是( ) A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状,培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由载体导入受体细胞 D、质粒可作为载体 B 不属于质粒被选为基因运载体的理由是( ) A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D * 特点:具有专一性(一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子) * 当二条链断开时,氢键不足以抵抗已断裂分子的张力了。 * 基因工程的载体还可以是噬菌体和某些动植物病毒。 * 基因工程的载体还可以是噬菌体和某些动植物病毒。 第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 第一章 基因工程 转让人胰岛素基因的大肠杆菌 细菌和人是差异非常大的两种生物, 通过某种生物技术,细菌能够合成人体的胰岛素,这个过程这样进行的呢? 这可不是普通的细菌,它是嫁接了人胰岛素基因的工程菌,能大量合成人胰岛素。 从大肠杆菌说起 一、基因工程 1.基因工程的概念 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。其核心是构建重组DNA分子。 首只转基因猪产生 基因工程诞生的理论基础: DNA是生物遗传物质的发现 DNA双螺旋结构的确立 遗传信息传递方式的认定 2.基因工程诞生的理论基础 DNA双螺旋结构的确立是基因能够重新拼接的结构基础 生物共用一套遗传密码是基因能在异体细胞中表达的基础 3.基因工程创建的技术保障 剪刀:限制性核酸内切酶 针线:DNA连接酶 运输工具:质粒等 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 质粒——载体 第一节 工具酶的发现和基因工程的诞生 一.限制性核酸内切酶(限制酶) 阅读课本,思考以下几个问题: 1、什么是限制性核酸内切酶?作用是什么? 2、限制性核酸内切酶如何识别、切割DNA分子? 3、限制性核酸内切酶的发现对于基因工程诞生有何意义? 1、限制性核酸内切酶的概念: 能够识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列的酶 2、特点:具有专一性 (一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列, 并在特定的切点上切割DNA分子) 重播 3、作用 能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并使得每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂 什么叫粘性末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的末端叫粘性末端。 *什么叫平末端? 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个粘性末端? 要切两个切口,产生四个粘性末端。 思考 基因的针线:DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T
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