国家结核病参比室 第一节 结核病防治实验室痰检工作 第一讲 痰涂片镜检 痰检工作的目的和意义 国家结核病规划(NTP) 与结核病细菌学实验室网络 检查对象 结核菌的形态和结构 痰涂片操作程序 常见标本的收集及处理 痰标本的采集-容器 痰标本的采集 留取标本 痰标本的运送 标本的性状 直接涂片的步骤 染色的步骤 痰检工作的目的和意义 在结核病控制工作中痰结核菌涂片镜检对于发现传染源、确定诊断和化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义 是国家结核病控制规划(NTP) 的重要组成部分,在现代结核病控制工作中起着不可缺少的重要作用 国家结核病规划(NTP)与结核病细菌学实验室网络 结核病细菌学实验室通过日常、有效的细菌学(病原学)诊断,发现传染源、决定化疗方案和评价治疗效果为实现NTP的重要目标服务 痰涂片镜检服务必需在健全的细菌学实验室网络中才能实现 国家结核病规划(NTP)与结核病细菌学实验室网络 结核病高负担国家NTP主要通过实施现代结核病控制策略(DOTS)来实现 痰涂片镜检是结核病细菌学实验室服务中最重要的内容之一。痰涂片镜检发现传染源是DOTS策略的重要组成部分 确定诊断的涂片检查应采集3个合格的痰标本 就诊当时在门诊留一份“即时痰”标本,同时给患者2个痰盒,嘱患者留取“夜间痰”和“晨痰”,于次日交验 检查对象 治疗中或复诊随访病人按期每次送检两份痰(当 日即时痰、当日或次日晨痰) 初治涂阳患者在疗程满2、5、6月时 复治涂阳患者在疗程满2、5、8月时 结核菌的形态和结构 结核杆菌用革兰氏染色,着色较差但呈兰色, 列为G+菌 结核杆菌用普通的染色方法不易着色,在染液 中加入石炭酸后才可着色 抗酸染色时,因结核杆菌菌体含有大量脂质,其脂质的含量占分枝杆菌之首,占菌体干重的40%,因脂质的含量大,所以不易着色,但经过加热或者提高石炭酸的浓度、延长染色时间等处理以后才能着色 一旦着色,不易被盐酸酒精脱色,而其他细菌均被脱色,把不被盐酸酒精脱色的细菌称为抗酸菌,这种方法称为抗酸染色法 【胸腹水】 【脑脊液】 【尿标本】 【脓液、病灶组织】 【痰标本,肺部深咳的痰】 【胸腹水的采取】 于试管中加20%的枸橼酸钠3—5滴,或10%的草酸钾 5—6滴,可防止15—20ml 胸腹水凝固。无菌采取胸腹 水以后应立即送检。可采取离心集菌或漂浮集菌法检查 【纤维支气管镜刷检物】 可将毛刷直接进行抗酸染色,也可将刷检标本洗脱于装有无菌生理盐水的试管中,再涂片检查 【脑脊液的采取】 无菌手术取得脑脊液以后,3000转离心30分钟,取沉淀物涂片染色检查 结核性的脑脊液放在冰箱中4℃过夜以后,会在液面形成一个倒漏斗状的薄膜,取此薄膜涂片染色镜检 痰涂片操作程序 【尿标本的采取】 通常留取清晨第一次全尿或中后段夜尿,也可留取24小时的尿液,放冰箱或阴凉处,静置,去上清,留沉淀部分50—60ml送检,取此沉淀液,经3000转,离心30分钟,取沉淀部分2ml直接涂片,染色检查 脓液直接涂片染色镜检 病灶组织或干酪样组织需充分研碎后再涂片检查 当前,贵州省疾病预防控制机构结核病实验室进行痰检 工作的耗材由项目统一提供: 螺旋盖痰瓶 可密封的塑料盒 可密封的蜡纸盒 留痰时应嘱咐病人尽量深咳,留取痰量3~5毫升 干酪痰、血痰、黏液痰为合格的标本唾液属不合 格痰标本 难以获得合格标本时,也应进行细菌学检查,但 应注明标本性状,以供分析结果时参考 需送上一级实验室检查的痰标本应置4℃冰箱保存, 外送前认真核对检验单与痰瓶上标注,放专用的冰 盒内运送,或用纸袋、塑料袋封装扎牢后顺序放入 包装盒,盒外注明请勿倒置标志 合格的痰标本应是患者深呼吸后,由肺部深处咳出的分泌物 【干酪痰】 标本外观以黄色(或奶酪色)、脓样、团块状的肺部 分泌物为主,粘度较粘液痰低,制片时较易涂抹 涂片染色后镜检,可发现大量脓性炎症细胞、肺上 皮脱落细胞 由于此类标本是由肺部深处咳出,对肺结核的诊断 最有价值,故抗酸杆菌(以下简称AFB)的检出率较高 【血痰】 此类标本是因粘液痰或干酪痰标本中混有血液而形成 颜色为褐色或深褐色、鲜红色或伴有血丝 涂片染色后镜检除能够观察到粘液痰或干酪痰的细胞
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