疏水层析相互作用.pptVIP

疏水作用层析Hydrophobic Interaction ChromatographyHIC 疏水层析的概念及原理 疏水层析过程 应用 发展趋势 一、疏水层析的概念及原理 “疏水作用”一词是Kauzmann于1959年首次在“蛋白质进展”杂志中提出的，随后陆续有学者发表用疏水层析成功分离蛋白质的文献报道；如钙调蛋白、苯丙氨酸裂解酶、凝集素等。 （二）原理 　　 高浓度盐与水分子发生强烈作用，导致疏水分子周围形成空穴的水分子减少，促进疏水性分子与介质的疏水配基之间发生结合 介质的选择 样品的准备 层析条件的优化 （一）、介质（基质+配基）的选择 基质主要有多糖类如琼脂糖、纤维素和人工合成聚合物类如聚苯乙烯、聚丙烯酸甲酯类。其中，半刚性的琼脂糖类凝胶仍是应用最广泛的疏水介质。 近年来研制超大(superporous)琼脂糖，在扩散孔的基础上增加了对流孔，在流速较高的条件下获较好的分辨率。 壳聚糖具有良好的生物相容性和化学稳定性，近年来在疏水层析中也得到了应用 HIC介质的疏水配基主要为烷基和芳香基，与反相层析介质相比，其烷基通常在C8以下，芳香基多为苯基 。 常用的疏水层析介质 ⒈ Octyl Sepharose 4 Fast Flow(辛基琼脂糖凝胶4FF)