生物化学第2章1.pptVIP

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  • 2019-09-07 发布于湖北
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3 . 氨基酸的重要化学反应 茚三酮反应 还原性茚三酮 O O OH H + NH3 + CO2 + RCHO 水合茚三酮 + RCH-COOH NH2 O O O + 2NH3 + O O OH H O O O O+NH4 N O + 3H2O 蓝紫色化合物 O O 反应分2步: 茚三酮反应常用于aa的定性和定量分析 茚三酮反应 在酸性条件下,氨基酸与茚三酮共热,生成紫色化合物。但脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质,此反应十分灵敏,根据反应所生成的蓝紫色的深浅,在570nm 波长下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量。也可在分离氨基酸时作为显色剂定性、定量地测定氨基酸。 Sanger反应 在弱碱溶液中,氨基酸的α-氨基与2,4-二硝基氟苯(DNFB) 反应,生成黄色的二硝基苯氨基酸(DNP-AA)。 DNFB + O2N NO2 F H2N CH COOH R DNP - 氨基酸 O2N NO2 HN CH COOH R + HF 此反应最初被Sanger 用于测定肽链 N-端氨基酸 Edman反应 N C S + 40℃,弱碱 N C NH R CH C O S 40℃, H+ 、硝基甲烷 COOH H2N CH R PITC 异硫氰酸苯酯 PTC- 氨基酸 苯氨基硫甲酰氨基酸 PTH- 氨基酸 苯硫乙内酰脲氨基酸 H N C

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