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动物细胞工程常用的技术手段: 动物细胞培养、 动物细胞核移植、 动物细胞融合、 单克隆抗体 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 阅读思考: 为什么要进行动物细胞培养? 什么是动物细胞培养? 一 动物细胞培养 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的 组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适 宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 阅读思考: 动物细胞培养的过程: 讨论: 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境知识,思考并讨论以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物资? 2.体外培养的细胞需要什么样的环境件? 动物细胞培养条件: 1、无菌、无毒的环境 (添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 2、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。) 3、温度和PH 36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境: O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 思考: 为什么要加动物学清? 为什么要加加二氧化碳? 动物细胞培养应用 大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体) 获得大量自身的皮肤细胞,用于植皮 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据 我们能否用植物组织培养的方法使动物细胞发育成动物个体? 过程 应用前景 1、加快家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、利用转基因克隆生物反应器 生产生物蛋白 4、克隆器官移植供体 此外:对研究胚胎发育及衰老过程;追踪疾病的发展过程及治疗都有重要作用 前景 存在问题 成功率低 存在健康问题 克隆动物食品的安全问题 小结: 3. 下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株 4.在克隆多利羊的过程中,下列哪项技术没有运用到 A.细胞培养技术 B.细胞核移植 C.胚胎移植技术 D.基因工程技术 为什么细胞培养要分散成单个细胞培养?怎样分散? 1.成块的组织中细胞与细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增值。 2.从健康动物体内取出组织块,剪碎,用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 动物细胞生长特性: 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 要求: 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 D 5.世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。请仔细看图后回答问题: 黑面绵羊去 核卵细胞 白面绵羊乳 腺细胞核 重组细胞 早期胚胎 另一头母绵羊子宫 克隆绵羊多莉 a b 电脉冲处理 妊娠、出生 ⑴写出 a、b所指的细胞工程各称:a b 。 ⑵实施细胞工程a时,所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是: 。 ⑶多莉面部的毛色是 ,判断依据: 。 ⑷继植物组织培养之后,克隆绵羊培育成功,证明动物细胞也具有 。 核移植 胚胎移植 卵细胞全能性较高 白色 遗传物质主要来自白面绵羊 全能性 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要成分 是什么?用胃蛋白酶行吗? 1.在进行动物细胞培养时,用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。 2.动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 * 提问: 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 植物组织培养, 植物体细胞杂交 思考:动物细胞培养的过程是怎样的呢? 2 为什么细胞培养要分散成单个细胞培养? 怎样分散? 3 用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要 成分是什么?用胃蛋白酶行吗? 5 什么是细胞贴壁和细胞接触抑制? 6 什么是原代培养和传代培养?传代培养的细胞 具有 什么特点? 1. 动物细胞培养室一般取什么样的组织、器官中 的细胞,为什么? 4. 胰蛋白酶分解细胞膜上的蛋白质吗?如何处理? 3、动物细胞培养过程: 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶( 胶原蛋白酶) 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 单个细胞 加培养液 遗传物质未改变 遗传物质已改变 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网
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