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烯醇式结构的5-BrU与G配对 吖啶类化合物可插入DNA双链导致双链结构改变 几个概念：点突变、转换、颠换 点突变：DNA序列上单个碱基的改变称为点突变，可分为转换与颠换两种。 转换（transition）：同型碱基的取代称为转换，有4种形式。 颠换（transversion）：异型碱基的取代称为颠换，有8种形式。 转换 颠换 点突变 缺失 插入 倒位 重排 8. 真核复制叉有1个Pol ?和2个Pol ?复合物 真核DNA复制叉模型 (三) 引发和延伸发生DNA聚合酶?/?转换 识别染色体DNA复制起点和DNA局部解旋后，Pol ?/引发酶复合物结合于复制起点，这一步叫做引发体组装。 引发体组装包括DNA解旋酶与Pol ?/引发酶相互作用。 1. 解旋酶与Pol ?/引发酶相互作用组装引发体 前导链：出现在引发后期 后随链：发生于每个冈崎片段合成之际 发生DNA聚合酶?/?转换的原因是Pol ?不具备持续合成能力 DNA聚合酶?/?转换的关键蛋白是RFC 2. DNA聚合酶?/?转换 真核DNA聚合酶转换和后随链合成 (四) 切除RNA引物有两种机制 RNAse HⅠ/FEN1 Dna2/FEN1 (五) 真核染色体在每个细胞周期只能复制一次 真核基因组复制仅发生在 S 期，在此期间，所有的DNA都必须且只能复制一次，这意味着所有的复制器都仅被利用一次； 真核生物的复制起始子是复制起点识别复合物（ORC），它募集相关蛋白因子，形成前复制复合体（pre-RC）； 对pre-RC形成和激活的调控使每个细胞周期内仅有一轮复制发生。 真核细胞的细胞周期 pre-RC的形成 ORC是起始子； Cdc6和Cdt1是解旋酶装载蛋白； Mcm2-7是解螺旋酶。 pre-RC虽然只在G1期形成，但只在S期才激活。 对pre-RC的调控使得每个细胞周期只有一轮复制 (六)端粒酶确保染色体末端复制完整 前导链产生完整的子染色单体。 后随链3?端留下缩短的未复制的ssDNA区。 端粒（telomeres）由富含TG的重复序列组成。 人的端粒重复序列为5’-TTAGGG-3?。 这些重复序列多为双链，但每个染色体的3’端比5?端长，形成单链ssDNA。这一特殊结构可解决染色体末端复制问题。 端粒酶的结构 端粒延长机制（爬行模型） 端粒酶对端粒3’端的延长解决了末端复制 DNA的反转录合成 Reverse transcription 第三节 RNA肿瘤病毒 ? DNA原病毒（或前病毒） ? RNA肿瘤病毒 Temin等提出，原病毒（provirus）DNA是RNA肿瘤病毒在复制过程中的中间物。 *反转录的发现发展了中心法则 Crick： 我本人的思想是基于 两个基本原理， 序列假说和中心法则。 sequence hypothesis ： 核酸片段的特异性完全由其碱基序列所决定，而且这种序列是某一蛋白质氨基酸序列的密码。 central dogma ： 遗传信息只能从核酸传向蛋白质，而不能从蛋白质传向核酸。 反转录病毒（retroviruses ）： RNA病毒，含有反转录酶 反转录：在反转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程。 RNA指导的DNA聚合酶活性； DNA指导的DNA聚合酶活性； RNase H的活性是指它能够从5??3?和3??5?两个方向水解DNA-RNA杂合分子中的RNA。 一、反转录酶以tRNA为引物合成双链cDNA 反转录酶有3种酶的活性： 反转录酶的结构 反转录病毒的基因组结构 反转录病毒RNA基因组转变为双链cDNA的途径 二、反转录病毒在宿主细胞内的主要活动 （一）反转录合成双链cDNA （二）双链cDNA插入宿主染色体形成原病毒 原病毒或前病毒：存在于真核染色体中和反转录病毒RNA基因组相对应的双链DNA序列。 gag基因编码几种病毒核心蛋白（衣壳蛋白）; pol基因编码3种酶：反转录酶、蛋白酶和整合酶; env基因编码插入病毒外膜磷脂双层中的糖蛋白。 （三）原病毒DNA转录产生病毒RNA 具有自我复制能力的反转录病毒基因组含有3个基因： 初级转录产物多蛋白Gag-Pol，经过蛋白酶水解，可产生反转录酶、蛋白酶和整合酶。 多蛋白Gag经过加工，生成4种病毒衣壳蛋白。 env基因编码的Env蛋白，经过加工以后插入病毒外膜磷脂双层。 这些病毒蛋白和病毒RNA基因组可以迅速组装成许多新的反转录病毒颗粒。 （四）病毒RNA经翻译和包装形成反转录病毒颗粒 反转录病毒的生活周期 DNA损伤修复 DNA Damage and Repair 第四节 DNA的可突变性与修复 遗传物质保持代代持续依赖于把突变概率维持在低水平上：生殖细胞的高突变率将摧毁物种；体细胞的高突变率将摧毁个体。 要使