- 1、本文档共17页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
实验二影响酶促反应的因素 一、实验目的 1.通过实验,观察温度、pH值、激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响。 2.能运用所学的生化知识对实验结果进行正确的分析。 二、实验原理 利用淀粉及其水解产物的颜色反应,来比较唾液淀粉酶在不同条件下催化淀粉水解的程度,从而判断温度、pH、激动剂和抑制剂对酶的活性影响。 淀粉 糊精 麦芽糖和葡萄糖 蓝色 碘 紫色→红色→无色 无色 碘 碘 + + + ↓ ↓ ↓ 二、实验原理 在低温时,酶活性降低,酶促反应速度较慢,甚至停止;随着温度升高,酶的活性恢复,反应速度加快;当达到最适温度时,酶的活性最大,酶促反应速度达到最大。人体内大多数的酶的最适温度在37℃左右。温度过高,酶变性失活,酶促反应速度下降,甚至停止。 每种酶都有最适的pH值,在最适pH值时,酶的活性最大,酶促反应速度最快;偏离酶的最适pH均可引起酶蛋白变性而降低或失去活性。唾液淀粉酶的最适pH值为6.8。 氯离子对唾液淀粉酶有激活作用;铜离子对唾液淀粉酶有抑制作用。 三、实验材料 1.1%淀粉溶液 取可溶性淀粉1g, 加5ml蒸馏水, 调成糊状, 再加80ml蒸馏水, 加热并不断搅拌, 使其充分溶解, 放冷, 最后用蒸馏水稀释至100ml。 2.pH3.0缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液205ml,0.1mol/L柠檬酸溶液795ml, 混合即成. 3.pH6.8缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液772ml,0.1mol/L柠檬酸溶液228ml, 混合即成. 4.pH8.0缓冲液 取0.2mmol/LNa2HPO4溶液972ml,0.1mol/L柠檬酸溶液28ml混合即成. 5.0.9%NaCl溶液 6.1% CuSO4溶液 7.碘液 9.试管架 11.试管夹 12.滴管 13.白瓷板 14.恒温水浴箱 15.电炉 16.烧杯 【注意事项】 1.注意实验器材的干净,避免杂质影响反应结果 2.各管反应时间应严格控制,保证一致。 四、实验方法 稀释唾液制备 用水漱口,含蒸馏水咀嚼2分钟后,把唾液吐进烧杯中备用。(注:唾液淀粉酶活性具有个体差异,按下述各实验方法进行实验,有部分同学可能失败,可重新操作,但在重做过程中,要根据第一次实验结果改变稀释唾液的用量,反应太慢,则增加稀释唾液用量,如果反应太快,则减少稀释唾液的用量) 煮沸唾液的制备 取上述唾液约5ml,放入沸水中煮沸5分钟,取出备用。 (一)温度对酶促反应速度的影响 管 号 1 2 3 缓冲液(pH6.8) 20滴 20滴 20滴 1%淀粉溶液 10滴 10滴 10滴 把三支管溶液摇匀,然后分别放至相应的温度中水浴预温 预温温度 0℃ 37℃ 37℃ 预温5分钟后取出,继续向各管加入相应唾液 稀释唾液 10滴 10滴 — 煮沸唾液 — — 10滴 把三支管摇匀,然后分别放至相应的温度中水浴10分钟,加碘2滴 水浴温度 0℃ 37℃ 37℃ 结果与分析 取白瓷板一块,向各凹分别加1滴碘液,每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴,加到已加有碘液的小凹中,观察颜色变化,直至与碘不呈色时(即只显棕黄色时),向各管加碘液1滴,摇匀观察颜色变化(切记勿摇动)。摇匀再观察。 (二)pH对酶促反应速度的影响 管号 1 2 3 1%淀粉溶液 10滴 10滴 10滴 pH5.0缓冲液 10滴 — — pH6.8缓冲液 10滴 — pH8.0缓冲液 — — 10滴 稀释唾液 5滴 5滴 5滴 把三支管摇匀,然后放至 37℃水浴10分钟,加碘2滴摇匀 结果与分析 将各管混匀,放进37℃水浴箱中保温。 取白瓷板一块,向各凹分别加1滴碘液,每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴,加到已加有碘液的小凹中,观察颜色变化,直至与碘不呈色时(即只显棕黄色时),向各管加碘液1滴,摇匀观察颜色变化。 (三)激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响 管号 1 2 3 4 1%淀粉溶液 10滴 10滴 10滴 10滴 pH6.8缓冲液 10滴 10滴 10滴 10滴 蒸馏水 2滴 — — — 氯化钠溶液 — 2滴 — — CuSO4溶液 — — 2滴 — Na2SO4溶液 — — — 2滴 稀释唾液 5滴 5滴 5滴 5滴 把三支管摇匀,然后放至 37℃水浴10分钟,加碘2滴摇匀 结果与分析 将各管摇匀,放进37℃水浴箱中保温。取白瓷板一块,向各凹分别加1滴碘液,每隔半分钟用滴管或玻棒从2号管取溶液1滴,加到已加有碘液的小凹中,观察颜色变化,直至与碘不呈色时(即只显棕黄色时),向各
您可能关注的文档
最近下载
- 临床路径培训(共29张课件).pptx VIP
- 2024年《全国教育大会》专题PPT课件.ppt
- 介入应急预案演练(坠床).docx
- JTG B05-2015《公路项目安全性评价规范》释义手册_(高清版).pdf
- 第四单元 三国两晋南北朝时期:孕育统一和民族交融单元质检卷(B卷)--2024-2025学年统编版七年级历史上册.docx VIP
- 二类医疗器械管理培训试题.pdf
- 乡镇建房地基购买合同5篇.docx
- 职业生涯报告(通用8篇).pdf VIP
- QGDW 10278-2021 变电站接地网技术规范.docx
- 第四单元 三国两晋南北朝时期:孕育统一和民族交融单元质检卷(A卷)--2024-2025学年统编版七年级历史上册.docx VIP
文档评论(0)