人类染色体标本的制备和G显带核型分析.ppt

人类染色体标本的制备和G显带核型分析;[目的和要求];[实验原理];染色体的带纹是染色体标本经过特殊处理后，每条染色体上沿纵轴显示出的一定数量、着色程度不同、宽窄不等的横纹。染色体带是染色体固有的、稳定的特征。染色体G显带是多种显带技术中的一种，是将染色体标本经胰蛋白酶处理后再用吉姆萨（Giemsa）染液染色。G显带技术因其方法简便，重复性好，带纹清晰且可长期保存而应用最为广泛。 核型是指一个体细胞有丝分裂中期的所有染色体，并按其大小、形态特征顺序排列所构成的图像。每一个体细胞含有两组同样的染色体，用2n表示。 染色体核型分析是细胞遗传学的重要研究手段，在临床多种疾病如染色体病、白血病、肿瘤等的诊断及研究中具有重要意义。;人类体细胞的正常核型;显带染色体：;[实验用品];[实验步骤];6. 低渗 弃上清。加入37℃预温的0.075 mol/L氯化钾 8 ml，吸管轻轻吹打混匀，37℃低渗处理20 min。 7. 预固定 加入1ml 新鲜配制的固定液（甲醇:冰醋酸 =3:1），轻轻混匀，1800 rpm 离心6 min。 8. 固定：弃上清，加入上述新鲜固定液8 ml，轻轻混 匀，室温下静置固定20 min。 9. 弃上清，重复固定1次。 10.弃上清，根据沉淀量多少加入适量滴数新鲜固定 液，轻轻混匀，制成磨砂状悬液。 11.制片：取上述悬液1～2滴，滴至沾有冰水或干燥的 洁净载玻片上，吹散，过火，空气干燥。 12.37℃温箱放置3～4天或70℃烘烤2 h进行老化处 理，以备显带分析用。;【实验方法和步骤】;(三) G显带的核型分析 1.选取染色体分散良好、长度适中染色体G显带核型 照片，首先进行计数，然后将每条染色体剪下。 2.配对：同源染色体形态相同，带型一样；非同源染色体的大小，形态等带型各异，根据这个原理，按照染色体的大小、形态、着丝粒的位置，随体的有无和G显带带型等特征将46条染色体配成23对。 3.染色体排列：将配成23对的染色体按大小次序排列，一对性染色体排在最后，并把排列好的23对染色体分组贴附于实验报告纸上。这样，经过剪贴配对好的正常人体染色体图即为正常人体核型图，可写成 46,XX或46,XY。;正常男性染色体G-??带核型;人类染色体G-显带特征口诀：;[注意事项];[作业与思考题]