饲用益生菌及其应.pptVIP

饲用益生菌及其应用 2010年下半年尤其是8、9月份，河南及其周边的安徽、江苏、河北、山东一带，相继发生了猪类似前两年的高热病。对此有专家进行了流行病学的调研， 发现本次猪病的流行表现主要是发热及细菌和病毒混合多重感染，给临床诊断带来了很大困难。很多疾病，仅免疫抑制性疾病的存在就影响了疫苗免疫效果。耐药菌株的出现使抗生素的疗效越来越差，甚至出现一用药便加速猪只死亡的现象。 随着我国集约化养殖业的迅猛发展，病害的大规模暴发，大量抗生素及其他违禁药物被用于疾病防治，引起了细菌抗药性及药物残留等一系列问题，严重影响了我国畜牧业的健康持续发展。为了解决养殖病害和食品安全等诸多矛盾，寻找绿色环保的抗生素替代品是目前的研究热点。 由此，益生菌产品应运而生。 一.益生菌的定义 益生菌(Probiotics) , 又称微生态调节剂、生态制品、活菌制剂，是指能够促进肠内生态菌群生态平衡．对宿主起有益作用的活的微生物制剂。 Fuller (1989 年) 将其定义为“一种通过改善肠道菌群平衡而对动物施加有利影响的活的微生物饲料添加剂。”这也是目前被普遍接受的有关益生菌的定义。 二.益生菌种类 第一代：乳酸菌类益生菌 第二代：双歧杆菌 第三代：LGG（鼠李糖乳杆菌） 被我国批准使用的益生菌有：芽孢杆菌、乳酸杆菌、粪链球菌、酵母菌、黑曲菌、米曲菌。 目前作为兽药和饲料添加剂的益生菌菌种主要有 芽孢杆菌属 乳酸杆菌属 酵母 单菌制剂 ①在工业生产条件下,菌种应保持存活; ②应能在长期储存和现场条件下保持稳定和活性; ③在动物肠道有存活能力(不一定繁殖) ; ④能对宿主动物产生有利的影响。 2.宿主 猪 鸡 牛 鱼 虾 （狗） 3.效果 猪 鸡 牛 鱼 虾 （狗） 4.作用机理 保持肠道内微生态平衡 畜禽胃肠道菌群是在长期进化过程中形成并与畜禽保持相对平衡稳定状态的菌群，它对畜禽的生长发育和抵抗疾病的能力具有重要意义。当畜禽胃肠道微生物平衡失调时，畜禽出现生产性能下降和疾病症状。 产生各种酶 益生菌可产生水解酶、发酵酶和呼吸酶，这些酶有利于降解饲料中蛋白质、脂肪和较复杂的碳水化合物。 抗感染 益生菌能增强畜禽免疫功能，合成细菌素、有机酸、溶菌酶、过氧化氢等物质，对有害菌有拮抗作用。 生物夺氧 一些需氧菌特别是芽孢杆菌会消耗肠道内氧气，造成厌氧环境，有助于厌氧微生物的生长，从而使失调的菌群平衡调整恢复到正常状态。 此外，益生菌还有合成维生素B族、抑制有害物质生成，产生抗菌素类物质及屏障作用等作用机制的说法。 5.猪肠道益生菌种类 6.饲用益生菌研究手段 传统方法 包含形态特征、生理生化反应、血清学反应等，这些方法都基于微生物表面受体的特异性，属于表型分类法。 分子生物学方法 DNA－DNA 分子杂交技术 recA 基因序列分析 GC％含量 基于16S 或23S rRNA 序列的DNA 标记技术 变性梯度凝胶电泳 1. DNA－DNA 分子杂交技术 将菌落裂解，使细胞内DNA 暴露，即可直接采用探针与该菌落进行原位杂交。对探针采用同位素、酶或荧光素标记后，可以使其容易被检测。目前，该方法已经被用来制备对双歧杆菌具有菌株或种特异性的核酸探针。 2. recA 基因序列分析 recA 基因负责编码recA蛋白质， 后者在DNA 重组、DNA 修复与SOS 应急反应中具有至关重要的作用。研究表明，recA 基因的一个小片段有望成为一种灵敏性高、能用于种间进化发育亲缘研究的分子标记。 3. GC％含量 同种生物体內的GC％是固定的，但不同种生物的GC％会有很大的不同。测定GC％的方法很多， 其中最广泛和通用的方法是以化学法水解DNA 后， 再用电泳或HPLC 来分析其中成分。DNA 的GC％含量测定已广泛用于微生物鉴定中。 4. 基于16S或23S rRNA序列的DNA 标记技术 16S 或23S rRNA序列的DNA 标记技术利用PCR 的方法， 采用针对16S rRNA 基因两端通用保守区的引物直接对所分离到的菌株进行16S rRNA 基因扩增， 然后测定整个PCR 复制子（约1．5 kb）的序列组成，并与rRNA 数据库进行比较。 5. 变性梯度凝胶电泳 DGGE是利用一个梯度变性胶来分离DNA 片段。由于不同DNA 片段的变性条件不同，因此可在凝胶上形成不同的泳带。它是一种快速、可靠、重复性好的益生菌（能够产生有益代谢产物）非培养检测和分析方法，它比传统的培养检测鉴定方法应用前景广阔。 其他研究方法