超敏pcr宣讲张忠新.pptVIP

高灵敏度病毒载量检测在肝炎 诊疗中的意义 HBV 感染是全球性卫生问题 33% 的人在一生中会感染HBV; 成年感染者中5%-10%会转为慢性乙肝, 全球约有3.5亿慢性HBV感染者; 每年,有100万人死于与乙型肝炎相关的肝硬化或者肝癌; = 每30s 夺走一个生命 感染率最高的区域在亚洲,非洲. Lavanchy. J Viral Hepat 2004; World Health Organization, 2008; Elgouhari, Cleve Clin J Med 2008 不同的标志物提供不同的诊断以及治疗监控的信息 诊断 启动治疗 鉴别 初始应答 预测 治疗应答 监测耐药 证明 持续应答 HBsAg HBsAg定量 抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc HBV DNA ALT Modified from Pawlotsky et al. Gastroenterol 2008 慢性乙型肝炎 干扰素或 口服核苷（酸） 类似物 口服核苷（酸） 类似物或 干扰素 观察，如ALT升高， 或肝组织炎症坏死 ≥G2,或纤维化≥S2 无肝硬化 有肝硬化 HBeAg+ HBV DNA≥20000 IU/mL HBeAg- HBV DNA≥2000 IU/mL ALT≥2ULN ALT2ULN ALT≥2ULN 失代偿期 代偿期 HBeAg+ HBV DNA≥ 2000 IU/mL HBeAg- HBV DNA≥ 200 IU/mL HBV DNA 可检测到 口服核苷（酸）类似物 中国慢性乙型肝炎防治指南（2010版） 高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断治疗起点 启动治疗 60 IU/mL 完全应答 2000 IU/mL 不充分应答 60-2000 IU/mL 部分应答 Week 12: 鉴别原发性无应答 Week 24: 疗效早期预测 Keeffe et al Clin Gastroenterol Hepatol 2007 高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断应答情况 QL=检测下限 (聚合酶链反应 (PCR)-检测不到 300 copies/mL 用 COBAS? Amplicor?) ?从锁定数据库来的初步数据 Di Bisceglie et al. 2006 24周HBV DNA, copies/mL 替比夫定 拉米夫定 HBeAg+ (n=921) HBeAg- (n=446) ≤QL 300–3 log 3–4 log 4 log ≤QL 300–3 log 3–4 log 4 log 203 146 57 63 83 79 107 165 68 60 25 5 88 78 63 20 0 20 40 60 80 100 178 157 18 20 16 24 10 20 2 年 时 PCR 阴 性 （%） 高精准HBV DNA检测能更准确预测远期疗效 高灵敏度HBV DNA检测比普通试剂能更准确判定病毒学突破 HBV DNA (log10 IU/mL) 5.0 4.0 3.0 2.0 1.0 6.0 病毒学突破 Antiviral drug Months 6 0 12 18 16 普通试剂 COBAS Taqman 检测灵敏度 南方医院用67例治疗前为HBV DNA强阳性样本，治疗24周后采用cobas TaqMan HBV检测与普通检测试剂结果对比 67例患者: HBeAg(+)，ALT≥2ULN，HBV DNA＞ 6.0 log10 IU/mL --治疗前用cobas检测结果为7.90±0.73 log10 IU/mL --治疗前用普通试剂检测结果为7.11±0.44 log10 IU/mL 检测试剂 病例数 HBV DNA分布范围 普通HBV 34例 33例 未检测到，100 IU/ml 300-105 IU/ml CAP/CTM HBV 8例 26例 33例 Target Not Detected 27~4.5E3 IU/ml 104~106 IU/ml 普通PCR法 “假阴性”率高达44% (26/59) cobas高灵敏度HBV DNA检测能更准确判断治疗终点，有效防漏检（实例1） COBAS HBV 430例血浆 Realtime PCR HBV1000 copies/mL 222例（51.6%）20 IU/mL 208/430(48.4%) 20 IU/mL 64/222（28.38%）E+02 copies/mL 2.0 test 107/222（48.20%）E+03 copies/mL 35/222（15.77%）E+04 copies/mL 7/222（3.15%）E+05 copies/m