细菌耐药机制专题医学知识宣讲课件.ppt

细菌耐药机制专题医学知识宣讲;;;一、外膜孔蛋白减少或丢失;细胞外膜上的某些特殊蛋白是一种非特异性的、跨越细胞膜的水溶性物质扩散通道。 ;革 兰 阴 性 细 菌 细 胞 膜;某些细菌本身存在的膜孔蛋白较少或蛋白通道较小，使一些抗菌药物不能进入菌体内部，称为“内在性耐药”或“固有性耐药”（intrinsically resistant），即这种耐药并非是由于任何染色体的突变或是耐药质粒的获得所致。 如铜绿假单胞菌的细胞外膜上没有大多数革兰阴性细菌所具有的典型的高渗透性孔蛋白，它的孔蛋白通道对小分子物质的渗透速度仅为典型孔蛋白通道的1%。 ;一些具有高渗透性外膜且对抗菌药物敏感的细菌可以通过降低外膜的渗透性而发展成为耐药菌，即原有的孔蛋白通道由于细菌发生突变而使该孔蛋白通道关闭或消失，则细菌就会对该抗菌药物产生很高的耐药性。 亚胺培南是一种非典型的β-内酰胺类抗菌药物，主要是通过一个特殊的孔蛋白通道OprD2的扩散进入细菌的，一旦这一孔蛋白通道消失，则产生耐药性。 ;产气肠杆菌从亚胺培能敏感株变为耐药株;亚胺培南敏感及耐药的产气肠杆菌PFGE图;亚胺培南敏感及耐药的产气肠杆菌SDS图;PCR扩增Omp36全长及序列分析;插入序列引起OprD2缺失（铜绿）;细菌产生一种或多种水解酶或钝化酶来水解或修饰进入细胞内的抗菌药物，使之到达靶位之前失去活性 细菌产生的灭活酶主要有： β-内酰胺酶 氨基糖苷类钝化酶 氯霉素乙酰转移酶 MLS钝化酶;;;ESBLs的分类;中国400株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的基因型分布;32家医院 1994-2003年大肠杆菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs百分率;头孢菌素酶; 阴沟肠杆菌;ACT-1,DHA-1,CMY (Peking);克隆片段;指所有能明显水解亚胺培南或美罗培南等碳青霉烯类抗生素的一类β内酰胺酶 分别属于Ambler分子分类中的A类、B类、D类酶 。 ;天然来源碳青霉烯酶 嗜麦芽寡养单胞菌的L1酶 获得性碳青霉烯酶（Ambler分子分类） B类酶（金属酶）：IMP、VIM类及SPM-1 A类酶：NMC-A、KPC-1、GES-2等 D类酶：OXA-23至OXA-27、40、48、54 ;金属酶;IMP型金属酶;中国;VIM型金属酶;VIM型金属酶分布;VIM-5 2004 土耳其 肺克 铜绿 VIM-6 2004 新加坡 恶臭假单胞 VIM-7 2004 美国 铜绿 VIM-8 哥伦比亚 铜绿 VIM-9，10 英国 VIM-11 阿根廷 意大利;; VIM-2基因整合子结构图; H22H26 g4 s5 s9 s10 s11 s12 s15 b2 b3 b28 w19w54Marker;Ａ类酶 包括阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌中由染色体介导的NMC-A、Sme-1～Sme-3、IMI-1酶，以及肺炎克雷伯菌中质粒介导的KPC-1-4酶、铜绿假单胞菌中质粒介导的GES-2酶。;二株产IMI-1阴沟肠杆菌PFGE结果; Antibiotics ;阴沟肠杆菌、接合菌质粒电泳图谱 ;Schematic representation of the cloned E.coRⅠfragment;抗菌药物;转化试验;PCR;转化菌质粒（亚胺培南耐药基因克隆）;克隆片段测序;D类酶 （OXA酶） 在Bush分群中属于2d类，对苯唑西林的水解活性很强。OXA型碳青霉烯酶对亚胺培南的水解活性较低，对头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南水解活性也很弱。 除OXA-23外，其它酶能被三唑巴坦、克拉维酸抑制。 OXA型碳青霉烯酶编码基因可位于质粒或染色体上，或定位在I型整合子基因盒中，具备向其他菌种转移的能力 ;blaOXA-23-like,blaOXA-51-like是我国鲍曼不动杆菌最主要的碳青霉烯酶，ISAba1与OXA基因的表达和转移密切相关;氨基糖苷类钝化酶分为： 磷酸转移酶（APH） 乙酰转移酶（AAC） 核苷转移酶（ANT） 氨基糖苷类钝化酶作用机制： 三者分别使抗生素的羟基磷酸化、氨基乙酰化和羟基核苷化，使之不能再与细菌核糖体结合。;庆大霉素高水平耐药（HLGR ） 主要的耐药机制 氨基糖苷类修饰酶 耐药基因 百分率 AAC(6’)-Ie-APH(2’)-Ia aac(6’)-Ie-aph(2’)-Ia ＞90% APH(2’)-Ic aph(2’)-Ic APH(2’)-Id