遗传的染色体基础.ppt

(2) DNA的复制过程 原核生物DNA的复制是从特定位点开始，单向或双向进行的，但以双向复制为主。双螺旋DNA边解链边合成新链。 复制过程主要包括起始、延伸、和终止3个阶段。涉及双链的解开、RNA引物的合成、DNA链的延长、RNA引物切除、相邻DNA片段的连接等主要活动。 E coli的复制起始点oriC的结构 DNA复制是从DNA分子的特定部位开始的，此特定部位称为复制起始点（origin of replication），用ori表示。如大肠杆菌的复制起始点长245bp，其两侧结构为： 左侧有3个13bp的重复序列，富含A-T 右侧有4个9 bp的重复序列是DnaA蛋白（DnaA基因的产物）的结合位点。 大部分的原核生物（细菌、病毒）和质粒只有一个复制起始点（ori），它控制着整个染色体的复制。这种由同一个复制起始点控制下合成的一段DNA序列就称为一个复制子（replicon）。 环状DNA复制时，首先必须使双螺旋在起始区打开，并逐渐扩大。打开的每一端形成一个Y形的区域，称之为一个复制叉（replication fork） DNA复制叉 ●DNA双螺旋的解链： DNA解旋酶 单链DNA结合蛋白（简称SSB蛋白） DNA拓扑异构酶 ATP ●DNA复制的起始： 引物酶 DNA聚合酶Ⅲ 引物酶以DNA为模板，在DNA链的特定位点直接合成一短的RNA引物，为DNA polⅢ开始DNA合成提供3 -OH。此时DNA的复制开始。 当RNA引物合成之后，在DNA pol Ⅲ的催化下，以4种三磷酸脱氧核糖核苷（dATP、dGTP、dCTP和dTTP，合称为dNTP)为底物，以两条亲代DNA链为模板，在 RNA引物3 -OH端按碱基互补配对的原则进行复制。 半不连续复制（semidiscontinuous replication）： ——在DNA复制过程中，一条链（前导链）连续合成，另一条链（后滞链）不连续合成的方式称为半不连续复制。 ●DNA复制的延伸： 在解开的两条单链中，以3→5方向的链为模板，从5→3方向连续合成的新链为前导链（leading strand）；而以5 →3链为模板合成的链称为后滞链（lagging strand），该链也是从5→3方向合成，首先合成不连续的小片段（冈崎片段），最后由DNA连接酶连接起来。 复制叉前进方向 后滞链合成中，后滞链模板链在DNA polⅢ全酶上形成一个回环，使RNA引物和冈崎片段的合成方向与前导链一致，使得双链在同一复制体上进行复制。这一模型称为回环模型。 由解旋酶、引发酶(引物酶)和DNA pol Ⅲ全酶构成的复合体称为复制体(replisome)。 ●DNA复制的终止： 对于E.coli这类环状染色体来说，两个复制叉反向而行，穿越相遇点并到达各自特定的终止位点。 环状DNA复制完成后，有拓扑异构酶II切开双链DNA，将两个DNA分子分开成为两个完整的与亲代DNA分子相同的子代DNA。 3.真核生物DNA复制的特点 真核生物的DNA复制过程也包括起始、链延伸和终止等步骤，但比原核生物更为复杂，主要表现在3个方面： (1) 真核生物具有5种DNA聚合酶: 即polα、β、γ、δ和ε。其中 polδ和α 的作用是复制染色体DNA，polδ控制前导链的合成，还具有3→5外切酶活性；polα催化后滞链的合成。pol γ是从线粒体中分离得到的，可能与线粒DNA的复制有关。 (2) 真核生物每一条染色体都含有多个复制起点 和多个复制子 箭头所示为多个复制点 在不同的组织细胞中，复制起点的数目和复制子的大小会随着细胞特点的变化而变化，如对于快速分裂的胚胎来说，发育早期比发育后期具有更多的复制起点 。 (3) RNA引物和冈崎片段 原核生物中RNA引物长约10-60个核苷酸，冈崎片段长度为1-2kb；真核生物RNA引物约10个核苷酸长，冈崎片段长度为100-200bp。 §2.6 染色体在细胞分裂中的行为 细胞的分裂方式包括无丝分裂（amitosis）、有丝分裂(mitosis)和减数分裂（meiosis）。 无丝分裂无纺锤体（spindle）形成，主要发生在原生生物、纤毛虫及一些特化的动植物组织中。 有丝分裂即体细胞分裂，通过分裂产生具有同样染色体数目的子细胞，在分裂中出现纺锤体。 减数分裂是真核生物在形成配子过程中发生的一种特殊的分裂方式。 细胞周期是指个体细胞的生命周期，也称细胞分裂周期。它是指一个细胞经生长、分裂而增殖成两个细胞所经历的全过程。 细胞周期(cell cycle) ●间期： ●细胞分裂期 G1期：第一个间隙，主要进行RNA、蛋白质和酶合成，细胞体