第七章薄层色谱法课件.pptVIP

第七章：薄层色谱法;一、色谱法的起源、发展及定义;一、色谱法的起源、发展及定义;气 质 联 用; 又称层析法，是一种依据物质的性质（溶解性、极性、离子交换能力、分子大小等）的不同，当流动相携带样品流经固定相时，样品各组分在两相中不断的重新分配，最终达到分离与提纯，以便于对样品进行定性和定量分析的分析方法。;二、色谱法的分类;按两相状态不同分类;二、色谱法的分类;按操作方法不同分类;二、色谱法的分类;按色谱分离过程的原理不同分类;色谱法;三、色谱过程;四、色谱曲线相关术语;第七章 薄层色谱法;? 薄层色谱是在平面上进行分离的一种方法，又叫平 面色谱法。通常将固定相(吸附剂)均匀地涂铺在表面洁 净的玻璃、塑料或金属板形成薄层，制成薄板，进行样品分离。;(一)吸附色谱分离原理 利用吸附剂对不同成分吸附力的大小及展开剂解吸附作用的差异进行分离。 吸附牢的组分随展开剂移动慢，吸附弱的组分随展开剂移动快，一段时后，组分被分离。 固定相:固体吸附剂 流动相:液体展开剂;溶剂前沿;（2）相对比移值Rs：为消除系统误差;二、吸附薄层色谱中吸附剂与展开剂;（1）硅胶：极性吸附剂，应用范围广 物理吸附为主，氢键吸附为辅 微酸性，不直接用于碱性成分的分离 机械强度好，适用于薄层色谱 吸附容量大，与羟基数目有关 常用硅胶的规格：硅胶H，硅胶G，硅胶GF254等 ;（2）氧化铝：a.极性吸附剂，较硅胶强。 b.物理吸附为主，氢键吸附为辅 c.微碱性，不直接用于酸类成分的分离 ; 硅胶和氧化铝含水量越高，吸附活性越弱。 只要在110℃左右加热，这些“自由水” 就能被可逆性地除去。利用这一原理可以对吸附剂进行活化（去水）和脱活化（加水）处理，以控制吸附剂的活性。 ;硅胶、氧化铝薄层：被分离物质极性越大，越易被吸附。 一般规律： （1）官能团极性越大，整个分子极性越大，越易被吸附； （2）形成分子内H键时，被吸附力减弱； （3）同系物中，分子量越大，极性越小，被吸附力越弱。 常见官能团极性顺序： 烷烃烯烃醚类硝基化合物酯类酮类 醛类硫醇胺类醇类酚类羧酸类;（二）展开剂（流动相）的选择;吸附剂、展开剂选择规律;硅胶薄层色谱规律总结;第二节 薄层色谱系统简介 第三节 操作方法及注意事项;1、薄层板的制备;薄层板分类和制法;（1）软板的制备;薄层板分类和制法;（2）硬板的制备;（2）硬板的制备;（2）硬板的制备;常用的薄层板： 软板：硅胶H板、氧化铝H板 硬板：常用的有硅胶G板、氧化铝G板、硅胶CMC-Na板、氧化铝CMC-Na板、硅胶GF[254] 、硅胶GF[356];2、点样;2、点样;2、点样;3、展开;3、展开;3、展开;c、单向二次展开 d、双向二次展开;3、展开;4、显色和定位;5、薄层扫描仪对色谱斑点进行扫描;判断依据：Rf值、Rs值;1、对照品比较法：;2、自身稀释对比法（杂质结构不明或无杂质对照品）;1、目视比较法：;2、斑点洗脱法 ;3、薄层扫描法; 取本品水蜜丸6g，研碎，或取小蜜丸或大蜜丸9g，切碎，加硅藻土4g，研匀。加乙醚40ml，低温回流1小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以环己烷－醋酸乙酯(3:1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性 5％三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。 （2005年版《中国药典》一部 401页）;1.丹皮酚； 2～5.六味地黄丸;二、醋酸可的松中其他甾体的检查;三、硫酸长春碱中杂质的限量检查;四、盐酸氯丙嗪中有关物质的限度检查;五、九分散中士的宁的含量测定 略 六、枳实导滞丸中陈皮苷的含量测定 略 七、黄连上清丸中盐酸小檗碱的含量测定 略