医学细胞生物学实验指导.docVIP

PAGE PAGE 31 普通生物学实验指导 供医学八年制使用 华中科技大学生命与技术学院 实验教学中心 目录 TOC \o 1-3 \h \z \u 实验一 显微镜的结构及使用方法 2 实验二 动物细胞形态结构的观察 5 实验三 细胞器的光镜切片观察 7 实验四 动物细胞培养 9 实验五 ABO血型鉴定与交叉配血 16 实验六 血涂片的制作与读片 19 实验七 细胞有丝分裂标本的制备与形态观察 23 实验八 蝗虫精巢减数分裂压片标本的制备与观察 27 实验九 人外周血染色体制备 30 实验十 正常人非显带染色体的核型分析 32 实验一 显微镜的结构及使用方法 一、实验目的 1. 学习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。 2. 学习并掌握油镜的原理和使用方法。 3. 了解几种特殊光学显微镜的工作原理及其使用 光学显微镜的使用 ( 一 ) 显微镜的结构及使用方法 光学显微镜，简称光镜 (microscope) ，是生物医学研究及临床工作中常用的仪器，每个学生都必须熟悉它的结构和性能，掌握其使用方法。 1 ．光学显微镜的主要构造 显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分 ( 图 1-1) 。 (1) 机械部分 ①镜座：亦称镜脚，是显微镜的基座，用以支持整个显微镜。 ②镜柱：是镜座向上直立的短柱，用以支持其他部分。 ③镜臂：是镜柱向上弯曲的部分，适于手握。有些显微镜镜柱与镜臂之间有倾斜关节。 ④镜筒：连在镜臂前方的镜筒部分，一般长度为16 cm 。有直筒和斜筒两种，前者镜筒上下可调节，后者镜筒是固定的 ⑤调节器：是装在镜臂上的大小两种螺旋，转动时可使镜台升降或使镜筒上下移动以调节焦距。 ??? ? 粗调节器 ( 粗螺旋 ) 转动时可使镜台或镜筒在垂直方向以较快速度和较大距离进行上下升降，调节物镜与标本的距离。通常在低倍镜下，先用粗调节器找到物像。 ???? 细调节器 ( 细螺旋 ) 形状较小，通常在粗调节器的下方或外侧，转动时可使镜台或镜筒缓慢地上下移动，以精细调节焦距，得到清晰的物像。 ⑥旋转器 ( 镜头转换器 ) ：装在镜筒的下端，呈盘状，下面有3 ～ 4个物镜孔供装置不同放⑦载物台 ( 镜台 ) ：用以放玻片样本，中间有一通光圆孔，称为镜台孔，由此孔可透入集光器传入的光线。 ⑧标本移动器：装于载物台上，用于前后左右移动玻片标本。移动器上有标尺，可以测定标本大小。 (2) 照明部分 ． ①反光镜 (mirror) ：是一个一面平一面凹的双面镜，装在镜柱基部的前方，可向任意方向转动，其作用是改变光源射出的光线方向，送至聚光镜中心，再经镜台孔照明标本。反光镜的凹面聚光作用较强，通常在光线较弱时使用；在光线强而均匀时，宜用平面镜。 有些显微镜采用电光源代替反光镜，使用时接上电源，在打开电源前，光照亮度旋至最小位置，然后打开电源，旋转亮度旋扭调节光照强度至适宜为止。关闭电源前，应先将光照亮度旋至最小位置。 ②聚光器 ( 又名集光器， condenser) ：位于载物台下方的聚光器架上，由聚光镜和虹彩光阑组成。 ?? ??聚光镜 由一片或数片透镜组成，其作用相当于一凸透镜，起会聚光线的作用，一般可通过装在镜柱旁的聚光器调节螺旋的转动而上下移动，上升时视野中光亮度增加，下降时光亮度变弱、虹彩光阑 ( 又名光圈， diaphragm) 在聚光镜下方，由十几张活动的金属薄片组成。其外侧伸出一柄，推动此柄可随意调节开孔的大小，以调节光量。 (3) 光学部分 ①目镜 (ocular) ：位于镜筒上方，常用的有5×，6×，8×，10×，12×，15×，数字越大，放大倍率越高，可根据需要挑选使用。一般装在镜筒上的是10 ×目镜。 ②物镜 (objective) ：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3 ～ 4个物镜。其中最短的刻有“4 ×”或“10×”符号的为低倍镜，较长的刻有“40×”符号的为高倍镜；最长的刻有“100×”符号的为油镜。 在物镜上，还有镜口率 (NA) 的标志。镜口率反映该镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨力越高。物镜的工作距离是指显微镜处于工作状态 ( 物像调节清楚 ) 时，物镜的下表面与盖玻片 ( 盖玻片的厚度一般为?0.17mm ) 上表面之问的距离。物镜的放大倍数愈大，它的工作距离愈小。显微镜的放大倍数是物镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如：物镜为10×，目镜为10×，其放大倍数就为l00 。 2 ．光学显微镜的使用方法 (1) 低倍镜的使用方法 ①检查：用右手握镜臂，从镜箱中将显微镜取出，左手托镜座，平稳地放到实验桌上。使用前应先检查一下显微镜各部分