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结核分枝杆菌的生物危害评估报告
结核病是由结核分枝杆菌(偶尔可由牛型或非洲型分枝杆菌)引起的一种细菌性疾病。结核病可累及全身各个器官,但以肺结核最为常见。该病具有传染性强,散播面广,不分地域均可发生。结核病可由呼吸道、消化道、皮肤等途径感染,但其主要传播途径是以空气为传播因子的呼吸道传染,而排菌的肺结核病人传染性更大,是传播感染的主要传染源。
1. 传播途径
呼吸道感染(respirator tract infection)是肺结核的主要传染途径(routes of infection),飞沬传染(droplet infection)为最常见的方式。传染源主要是排菌的肺结核患者(尤其是痰涂片阳性未经治疗者)。飞沬核(droplet nuclei), 10μm时可被吸人呼吸道,健康人可因吸入患者咳嗽、打喷嚏时喷出的带菌飞沫而受感染。
2. 危害程度分级
微生物按其是否致病、致病力强弱、危害人体的严重性、传染性的大小、临近人群的抵抗力、有无免疫制剂和特效治疗药物等综合评价,可分为四个不同的危害等级。结核分枝杆菌属于3级危险。
3级危险(对个体具有极大危害,对群体具有较大的危害性):指有特殊危险的致病菌。感染后症状较重,并可能危及生命,或者缺乏有效的预防方法、发病后不易治疗的微生物。
3. 实验室感染的原因及预防
(一)技术操作可能导致的感染及其预防措施。
1. 接种:应使用无弹力的铂丝接种环,结核菌接种后接种环火焰灭菌易崩散,酒精灯烧灼时要特别注意。
2. 混匀:吸管吸吹菌液时不要产生气泡,应沿容器壁排出。
3. 研磨:最好使用组织研磨器,乳钵易产生气溶胶。
4. 移液:吸管上端的棉花松紧要适度,吸液时要从管底吸取,吹出时要轻缓,不要全部吹净,以免产生气泡,形成气溶胶。
5. 开封:要避免压力和气流的急剧变化。
6. 离心:离心管套底垫要完好,使用匹配的管、套、离心头,加盖。
7. 注射:做好个人防护,正确使用注射器。
8. 搬运:室内移动要避免滑落,移出室外要有坚实密闭的外包装。
(二)技术保障
1. 双人原则,不允许单人操作1、2类病原。
2. 入口处应有危险警示标识,并标明所操作的微生物的种类。
3. 培训考核上岗,掌握相关技术操作要领,熟悉规章制度,适应工作环境。
4. 完备的管理措施,技术操作规范。
5. 良好的工作行为可降低生物危害风险。
4. 实验室中的分枝杆菌及分枝杆菌气溶胶
结核病实验室工作人员,在分枝杆菌检验过程中,会接触到各种潜在感染源标本和各种危险物,特别是许多操作易产生分枝杆菌气溶胶。含有结核分枝杆菌的微滴核(1-5微米)通过呼吸进入人体肺泡,可以黏附在肺泡内生长繁殖。因此,首先要对实验室中生物危险物产生的途径和存在的地点有充分的认识,以便明确生物安全防护的环节。
(一) 分枝杆菌存在的地点
1、各种临床标本,通常是痰,胃或支气管灌洗液、脑脊液、尿液等。
2、被污染的操作台、器械、仪器、试剂等。
3、收集的结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌菌株等。
4、细菌学实验室的部分区域。
(二) 产生分枝杆菌气溶胶
1、实验室内可疑肺结核患者痰标本的采集。
2、样本的制备和涂片的火焰固定。
3、分离培养或接种培养物。
4、用火焰烧灼接种环。
5、使用移液器混合培养物。
6、培养管或培养瓶中含有培养物的滴落物。
7、溢出的分枝杆菌悬浮液。
8、高速混合含有分枝杆菌的液体。
9、转移液态培养物和上清液,或培养液、上清液的倾倒。
10、离心过程中离心管的破碎。
11、用做原代培养所需的组织匀浆。
5. 安全防护
(一) 严格遵守实验室安全操作规程,任何时侯都要警惕分枝杆菌气溶胶的产生。实验室的技术人员必须经过生物安全培训后方可上岗。
(二) 实验室应严格限制非实验人员进入,减少实验室内外交叉生物污染。完成实验工作离开实验室,要关好门窗。
(三) 进入实验室应避免携带非必需物品。
(四) 进入实验室,工作人员应穿着工作服,操作时应穿戴防护隔离衣、口罩、帽子和手套,长发者应将头发装束在帽子内。
(五) 实验过程中绝对禁止吸烟、饮食等,不要以手抚头面部等。
(六) 试验前须开启紫外线灯对实验室和操作区域进行照射消毒1小时以上;试验结束后,立即开启紫外灯进行照射消毒2小时以上。
(七) 任何试验的开始和结束后,操作人员要用70%酒精浸泡双手或仔细擦后,用清洁剂或清水洗净。
(八) 每次试验结束后,必须清理好实验台,并用70%酒精液或3-5%石炭酸擦洗实验台面。
(九) 实验室中的生物危险品要根据检查项目和性质不同,局限在相应的试验区间,不得随意将其带到其它的实验室。
(十) 实验室内任何微生物的样本,废弃物都必须经高温高压灭菌
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