优化蛋白质免疫印迹.pptxVIP

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2019-09-23 发布于广东
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优化蛋白质免疫印迹 Western Blot;Western Blot基本原理 Western Blot一般流程 Western Blot优化条件的选择;定义;Western Blot基本原理;Western Blot 一般流程;Western Blot（间接）一般流程: ;Western Blot可优化条件：;不连续的电泳缓冲体系。 SDS—蛋白质复合物在凝胶电泳时，不再受蛋白质电荷与形状的影响，而只取决于蛋白质分子量的大小。 ;灌制分离胶隔绝空气;灌制积层胶插入梳子 ;凝胶浓度与蛋白分离范围;（2）避免电泳中出现以下情况;需要注意：;（3）要测定蛋白浓度，且加样量均匀，;2.转移膜的选择; NC膜与PVDF膜特性：; 三种膜的比较 ;3.封闭;4.抗体浓度的确定;如何滴定抗体浓度;5.二抗注意事项：;6.洗涤;7.检测：显色方法的选择;小结;Thank you！