微柱凝胶法血型鉴定操作规程.pdfVIP

微柱凝胶法 2 1 标本： EDTA-K 抗凝血 2.0ml 2 原理： 2.1 人红细胞抗原与相应抗体发生特异性免疫反应（其本质 为血凝反应） ； 2.2 检测系统是在微柱中（载体）装有的介质凝胶； 2.3 凝胶间隙具有分子筛作用。凝集的红细胞（结合的）被 留在微柱上面成带状或凝集颗粒散布凝胶中间。未凝集的红 细胞（即未结合、游离的）通过离心后沉入微柱的底部； 2.4 微柱凝胶中所含的特异性单克隆抗 A、抗 B 试剂检测红 细胞上相应的血型抗原，从而鉴定红细胞的血型。 3 操作： 3.1 在 A1 孔悬空加入 50ul 标准 A1 红细胞，在 B 孔悬空加入 50ul 标准 B 红细胞，再在两孔中各加入 50ul 样品血浆。 3.2 在 A、B、D、C、E、Ctrl 六个孔内分别悬空加入 5%病人 红细胞悬液 10ul 3.3 将卡放到戴安娜专用离心机中离心 9 分钟 3.4 离心结束后在白色背景前观察结果 4 结果判断： A 孔阳性 B 孔阴性为 A 型 ;A 孔阴性 B 孔阳性为 B 型 ; A 孔阴性 B 孔阴性为 O型 ;A 孔阳性 B 孔阳性为 AB 型。 凝集强度 描 述 阴性 100% （全部）的红细胞沉在微管的底部 +/- 100% （全部）的红细胞沉在微管的下端 1/3 之内 1+ 80%（大部分）的红细胞沉在微管的下端 2/3 之内 2+ 80%（大部分）的红细胞沉在微管的上端 2/3 之内 3+ 80%（大部分）的红细胞沉在微管的上端 1/3 之内 4+ 凝集的细胞处于微管的顶部 DP（双群） 红细胞同时位于微管上部和微管底部 H （溶血） 微管中液体出现透明红色 5. 注意事项 5.1 严格按操作规程操作，认真核对标本并作好标记。 5.2 应先加红细胞悬液，然后再加血浆。 5.3 为了防止冷凝集现象的干扰， 一般应在室温下进行试验。 5.4 严格控制离心速度和时间，防止假阳性或假阴性结果。 5.5 未用的微柱凝胶免疫检测卡应入室温保存， 用完后放 4 ℃ 冰箱保存 1 周。 5.6 判断结果后应仔细核对，记录，避免笔误。 6. 方法评价 卡式法定型使用安全，操作简单，结果稳定可靠，灵敏 度高，重复性好，但费用昂贵，需要特殊的仪器设备。