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实验三离体蛙心灌流;一、实验目的;1、心肌的生理特性:
2、两栖类动物的心起搏点:
3、心肌兴奋性的周期性变化:;有效不应期 = 收缩期 + 舒张早期
;1、心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境(离子浓度、pH等),内环境的变化直接影响到心脏的正常节律性活动。
2、因此可用人工灌流的方法,观察灌流液成分的改变对离体心脏活动的影响。
无Ca2+任氏液;
任氏液(1% KCl;1% CaCl2;2% CaCl2)。
;1、神经调节:在体心脏受交感神经和迷走神经的双重支配。
交感神经末梢释放NE(去甲肾上腺素),使心肌收缩力加强,传导速度加快,心率加快,即产生正性变时、变力、变传导作用;
迷走神经末梢释放Ach(乙酰胆碱),使心肌收缩力减弱,心肌传导速度减慢,心率减慢,即产生负性变时、变力、变传导作用 。
2、体液调节
0.01% Adr(肾上腺素)
0.01% Ach(乙酰胆碱)
;三、实验器材及药品;实验药品:
任氏液
无Ca任氏液
1 % KCl
1 % CaCl2
2 % CaCl2
0.01% Ach
0.01% Adr
; 四、手术操作 ;(腹面) ;2. 蛙心插管(操作难点);蛙心插管步骤小结:;3.游离蛙心;五、仪器连接;将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉,再将蛙心夹上的系线与张力传感器相连。;六、软件操作;1.描记正常蛙心收缩曲线
曲线疏密:代表心跳频率。
曲线的规律性:代表心室的节律性。
曲线的顶点水平:代表心室收缩的程度。
曲线的基线:代表心室舒张的程度。;2.期前收缩和代偿间歇;3.改变灌流液成分对心脏活动的影响
; (1)吸出插管内全部任氏液,换入无钙任氏液,观察心缩曲线变化,待效应明显后,吸出灌流液,用新鲜任氏液换洗3次,直至心缩曲线恢复正常。; (2)加1-2滴1% KCl于新换入的任氏液中,观察心缩曲线的变化。待出现效应后,用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。; (3)加入1-2滴1% CaCl2于新换入的任氏液中,观察心缩曲线的变化。待出现效应后,用新鲜任氏液换洗3次至曲线恢复正常。;
(4)加入1-2滴0.01% Adr于任氏液中,待效应出现后,用任氏液换洗至曲线恢复正常。;(5)加入1-2滴0.01%Ach于任氏液中,待效应出现
后,用任氏液换洗至曲线恢复正常。;(6)钙僵:
加入4-5滴2% CaCl2于新换入的任氏液中,观察心缩曲线的变化。;八、注意事项;
观看实验录像……;九、讨论分析;部分结果分析;高K+任氏液,心跳明显减弱甚至停跳于舒张状态
;高Ca2+,心缩加强,舒张不完全,甚至停于收缩状态
;部分结果分析;乙酰胆碱,心缩减弱,心率减慢,兴奋传导速度变慢;心肌的生理功能依靠内环境的稳态;
各种离子对心肌收缩力的影响主要依赖Ca2+来实现。
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