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果蝇遗传实验报告记录 PAGE PAGE 1 ———————————————————————————————— 作者： ———————————————————————————————— 日期： PAGE 1 经典遗传学综合性实验 10农生1班第一组 卢** 摘要 通过一次杂交实验完成果蝇的单因子实脸、双因子的自由组合、三点测交及伴性遗传这4个独立杂交实验。果蝇的分类：昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇属(Drosophila)有3000多种，我国已发现800多种，遗传学研究中常用的是黑腹果蝇（D.melanogaster)。果蝇形体小，生长迅速，繁殖率高，饲养方便，世代周期短（12天可繁殖一代），突变性状多，染色体数目少，基因组小，实验处理方便，容易重复实验，便于观察和分析,是遗传学、细胞生物学、分子生物学、发育生物学等研究中的模式动物。 关键词 黑腹果蝇 单因子实验 双因子实验、三点测交 伴性遗传 1 引言 果蝇在25℃条件下，羽化后的雌蝇一般在8小时后开始交配，两天后开始产卵。受精卵经22～24小时就可孵化成幼虫。幼虫生活4天左右即开始化蛹，化蛹前的三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的表面（如培养瓶壁），起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将要羽化了。刚从蛹壳中羽化出来的果蝇，虫体较肥大，呈半透明的乳白色，约1小时，蝇体即变为粗短椭圆形，双翅伸展，体色加深。遗传规律的实质： = 1 \* GB3 ①在杂交试验中，配子形成和受精时染色体的行为跟基因的行为是一致的；② 在形成配子的减数分裂过程中，凡是同源染色体及其负载的等位基因间要彼此分离，非同源染色休及其负载的非等位基因间要自由组合； = 3 \* GB3 ③四线期伴随着同源染色休的非姊妹染色单休间片段的交换，导致连锁群的等位基因间要发生一定的重组； = 4 \* GB3 ④位于性染色体上的基因其遗传行为与性别有关。 材料与方法 2. = 1 \* Arabic 1．1材料：黑腹果蝇，基本性状： （6#）小翅、灰身、白眼、焦刚毛； （e#）长翅、黑体、红眼、直刚毛。 2.1. = 2 \* Arabic 2用具：显微镜、白瓷板、毛笔、麻醉瓶、培养瓶和恒温培养箱 2.1. = 3 \* Arabic 3试剂：乙醚、无水乙醇、玉米粉、蔗糖、酵母、琼脂、丙酸。 2.2实验步骤 2．2．1果蝇培养基制备普通培养基制备。 基础培养基：A:蔗糖12.4g 、琼脂1.24g、水76mL，煮沸溶解。B：、玉米粉16.5g、水76mL，搅匀。A与B混合，加热煮至糊状，待稍冷却加入1.4g酵母和1.0 mL丙酸，搅拌均匀分装。每管培养基厚度约2.0 cm。 2. 2. 2 分离定律的验证。 亲本正反交 = 1 \* GB3 ①正交： 父本(e)：长翅、黑体、红眼、直刚毛 母本(6)：小翅、灰身、白眼、焦刚毛； = 2 \* GB3 ②反交： 父本：小翅、灰身、白眼、焦刚毛； 母本：长翅、黑体、红眼、直刚毛。 注：母本均取8 h 内羽化未交配的雌蝇。 转移亲本 杂交6—7d后，F1幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。 F1性状观察（伴性遗传） 3—4d后，出现F1成蝇，观察F1的分别统计正反交F1成蝇的性状和性别，记录在表。 2. 2. 3 自由组合的验证 F1自交 取8 h 内羽化未交配F1的成虫，在乙醚麻醉下选雌雄各5只，饲养于基础培养基中，使之随机交配。 转移亲本 杂交6—7d后，F2幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。 观察记录F2的表现型及雌雄体的个数 2. 2. 4 三点测验计算遗传距离 F1测交 取8 h 内羽化未交配F1的雌蝇与三隐性雄果蝇(6号)各5只进行随机交配。 转移亲本 杂交6—7d后，F2幼虫出现，将杂交瓶中的成虫全部转移，要注意除净亲本成虫。 观察记录F2的表现型及雌雄体的个数。 2. 5统计分析 3 数据记录 表1 F1代表现型记录 统计项目 交配方式 F1的表现型 数目 正交 雌性 红眼长翅直刚毛灰体 110 雄性 白眼小翅焦刚毛灰体 127 反交 雌性 红眼长翅直刚毛灰体 123 雄性 红眼长翅直刚毛灰体 99 表2 测交后代各表现性及雌雄性记录 表现型 基因型 雌性 雄性 总数 白眼、小翅、焦刚毛 Wmsn 41 29 70 红眼、长翅、直刚毛 +++ 38 37 75 红眼、小翅、焦刚毛 +msn 15 9 24 白眼、长翅、直刚毛 w++ 10 5