非洲猪瘟实验室诊断课件.ppt

非洲猪瘟实验室诊断;定义;可表现为最急性、急性、亚急性和慢性四 种形式 严重程度与毒株、猪种及流行时间的长短 有关 急性型以高热、食欲废绝、皮肤发绀、网 状内皮系统出血为特征，发病后2-10天内 死亡，病死率可高达100% 临床上，与古典猪瘟非常相似，难以区分 目前没有疫苗！！！;只感染猪 家猪和欧亚野猪非常易感 – 感染后存活的猪可能变为无症状的携带者 非洲的野生宿主能持续感染很长时间并且 没有临床症状 软蜱是自然界中的贮主并且可以作为传播 媒介 法典中将非洲猪瘟的潜伏期定为15天。;重要性 OIE动物卫生法典要求必须报告的动物疫病 我国动物疫病名录一类动物疫病 我国《中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》 明确重点防范的外来动物疫病;;特点之一：基因组大;病原 特点之二：基因多变 基因组两端各有一个高变区，基因型多达22个;;临床症状;临床诊断;临床诊断;临床诊断;诊断 病理诊断;;;;慢性型;;;;;;鉴别诊断;;;实验室诊断;实验室诊断;实验室诊断的安全原则;良好的工作区域;GLP (good laboratory practice);实验室诊断技术储备;间接ELISA检测病毒抗原;分子生物学检测方法;荧光PCR检测病毒DNA;荧光PCR工作单 样品的可追溯性！;荧光PCR检测病毒DNA-试剂准备;荧光PCR检测病毒DNA-试剂制备;荧光PCR检测病毒DNA-仪器设备;荧光PCR检测病毒DNA-样本处理;提取病毒DNA;提取病毒DNA （2）;提取病毒DNA （3）;荧光PCR检测病毒DNA—OIE方法;;荧光PCR检测;荧光PCR检测病毒DNA-实验结果;荧光PCR检测病毒DNA-结果判定;实时荧光RPA;实时荧光RPA检测ASFV;实时荧光RPA检测ASFV;ASFV的基因型;2017/5/15;血清学检测方法;血清学检测方法;确诊 免疫印迹(Immunoblotting)：半纯化病毒抗原 间接免疫荧光（IFI）：E70毒株感染的传代细胞 免疫过氧化物酶试验（IPT）：病毒感染的细胞 对操作人员的要求较高;免疫印迹（IB）方法;间接免疫荧光（IIF）;免疫过氧化物酶（IPT）;非洲猪瘟间接ELISA抗体 检测试剂盒;;;;血清学诊断小结;实验室诊断;;实验室检测;;建立的方法在英国OIE参考实验室得到确认。;参考资料;谢谢大家！