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- 2019-09-16 发布于天津
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选 修 三;1;易 错 清 零;易错点1 误认为目的基因的插入是“随机”的
点拨:目的基因的插入位点不是随意的:基因表达需要启动子与终止子的调控,所以目的基因应插入到启动子与终止子之间的部位,若目的基因插入到启动子内部,启动子将失去原功能。
易错点2 混淆启动子与起始密码子,终止子与终止密码子,不明确标记基因的作用
点拨:启动子≠起始密码子,终止子≠终止密码子;(1)启动子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端。它是RNA聚合酶识别、结合的部位。
(2)终止子:一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。作用是使转录过程停止。
(3)起始密码子和终止密码子位于mRNA上,分别控制翻译过程的启动和终止。
(4)标记基因:一般为抗生素抗性基因或荧光基因等,其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(目的基因是否导入成功),从而将含目的基因的细胞筛选出来。;
易错点3 误认为切取目的基因与切取载体时“只能”使用“同一种酶”
点拨:(1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶,以获得相同的黏性末端。但如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时,在DNA连接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。
(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接即所谓“环化”可用不同的限制酶分别处理目的基因和载体,使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端。;易错点4 不清楚动物细胞培养时,为何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶
点拨:进行动物细胞培养时用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。分散细胞时不能用胃蛋白酶,因为胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.8。胰蛋白酶作用的适宜pH为7.2~7.8,而多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4。
易错点5 混淆原代培养与传代培养
点拨:(1)原代培养:细胞悬液第一次在瓶中培养,没有分瓶培养之前的细胞培养。
(2)传代培养:原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后,由于空间不足或细胞密度过大导致接触抑制影响细胞的生长,因此需要重新用胰蛋白酶等处理,进行分瓶扩大培养,即传代培养。;易错点6 误认为动物细胞培养液中加入5%CO2的目的是维持气体平衡或用于呼吸
点拨:动物的细胞培养时,需向培养液中加入5%CO2(+95%空气),加入CO2的目的是“维持培养液的pH”。
易错点7 不清楚动物细胞克隆化培养时为何常选10代以内的细胞,而“瘤细胞”却为“50代以后”
点拨:取供体动物的体细胞培养,一般选用传至10代以内的细胞,因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型,保证了供体细胞正常的遗传基础。然而欲获得“无限增殖”的“瘤细胞”则往往在“50代以后”,其遗传物质已发生变化,具“癌变”特性。;易错点8 不清楚植物脱毒苗培养时选择要求及原理
点拨:由于植物分生区附近(如茎尖)的病毒极少,所以常采用茎尖组织培养技术获得脱毒苗。
易错点9 误认为植物组织培养均需“再分化至幼苗”,误认为“人工种子”即平常所说的“种子”
点拨:(1)组织培养的目的不同,培养的阶段不同。如:生产细胞代谢产物,只需培养至愈伤组织时期;生产人工种子,则需要培养至胚状体时期;获得植株就需培养至幼苗时期。
(2)人工种子是通过无性生殖(植物体细胞的组织培养技术)形成的,只有一个亲本的性状;自然种子是有性生殖的产物,具有两个亲本的性状。;
易错点10 误认为克隆动物的产生体现了“动物细胞全能性”不能解释克隆动物性状“变异”的成因
点拨:核移植形成重组细胞发育成一个新个体,体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同,主要源于如下三方面:①克隆动物绝大部分DNA主要来自于供体细胞核,但其核外线粒体中的DNA主要来自于受体卵细胞;②性状是基因与环境共同作用的结果;③在个体发育过程中有可能发生基因突变,产生供核动物没有的性状。;
易错点11 误认为精子“获能”就是获得能量并认为排卵就是排出卵子
点拨:关注受精过程的3个易混点
(1)精子获能是指精子获得受精“能力”,而不是获得能量。
(2)排卵是指卵子从卵泡中排出,而不是卵泡从卵巢中排出。
(3)受精的标志≠受精完成的标志:受精的标志是在透明带和卵细胞膜之间观察到两个极体;而受精完成的标志是雌雄原核的融合。;易错点12 对卵裂阶段物质含量和体积大小的变化模糊不清
点拨:(1)卵裂阶段的细胞分裂方式为有丝分裂;
(2)受细胞膜制约,从受精卵到囊胚阶段总体积不变或略有减小,但细胞数目增多,所以每个细胞体积减小;
(3)伴随细胞分裂,细胞数目增多,总DNA含量增多,但每个细胞中DNA含量保持相对稳定;
(4)该过程中有机物总量减少,因为细胞一直进行呼吸作用消耗有机物但不从外界吸收营养物质。;易错点13 误认为胚胎移植的胚胎只能来自“体外受精”;
易错点14 混
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